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恒河猴胚肾细胞;FRhK-4 [FRhK4]图片
点击次数:88发布时间:2017/11/30 16:46:33
更新日期:2021/11/4 11:55:12
所 在 地:中国大陆
产品型号:
相关标签:ATCC细胞
优质供应
详细内容
细胞名称 恒河猴胚肾细胞;FRhK-4 [FRhK4]图片
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 FRhK-4细胞株来自300克重恒河猴正常雌性胚胎的肾组织。该细胞系是上皮细胞样的连续细胞株,且已被数家实验室用作甲型肝炎研究。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C57
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
恒河猴胚肾细胞;FRhK-4 [FRhK4]图片 操作步骤:
恒河猴胚肾细胞;FRhK-4 [FRhK4]图片 操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
钠离子通道蛋白7α/Na+ CP type VIIα抗体规格:?0.1ml英文名称:SCN7A
SCN1A抗体规格:?0.1ml英文名称:SCN1A
5-羟色胺转运蛋白抗体规格:?0.1ml英文名称:SLC6A4
链霉素抗体规格:?0.1ml英文名称:streptomycin
磷酸化SH2结构域转化蛋白1抗体规格:?0.1ml英文名称:phospho-SHC (Tyr239 + Tyr240)
DNA结合蛋白2抗体规格:?0.2ml英文名称:SATB2
转录因子蛋白SIM2抗体规格:?0.2ml英文名称:SIM2
膜内蛋白酶4抗体规格:?0.2ml英文名称:SPPL2B
丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶p38γ抗体规格:?0.1ml英文名称:SAPK3
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶p38γ抗体规格:?0.2ml英文名称:phospho-SAPK3 (Thr183+Tyr185)
尿素转运型糖蛋白A2抗体规格:?0.2ml英文名称:SLC14A2
可溶性载质转运蛋白3A1抗体规格:?0.2ml英文名称:SLCO3A1
含氧酸辅酶A转移酶2A抗体规格:?0.1ml英文名称:SCOT2
氏菌抗体规格:?0.2ml英文名称:Salmonella enteritidis
S0007苏木色精/苏木素/苏木色素/苏木精/Hematoxylin进分517-28-2高纯,95%5克RT,避光
进分25克
进分100克
进分1公斤
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,BS50毫升
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,250毫升
中文名称: 苏木色精
其他中文名称: 苏木素;苏木色素;苏木精
英文名称: Hematoxylin
其他英文名称: 7,11b-Dihydrobenz[b]indeno[1,2-d]pyran-3,4,6a,9,10(6H)-pentol;C.I.75290;Natural Black 1
产品规格: BS
包装:50毫升/250毫升
产品规格: 高纯,95%
包装:5克/25克/100克/1公斤
CAS号:517-28-2
C16H14O6?3H2O=356.36
级别:BS
使用步骤:
1.将样本涂于清洁的玻片上,制成薄涂片。
2.将涂片放于95%乙醇或95%乙醇等量的混合液中,固定5~10分钟,然后温火烤烘干。
3.在蒸馏水中漂洗几下,放苏木素染液中5~10分钟。
4.取出水洗。
级别:High Purity Grade
含量:≥95%
熔点:140℃
溶解性:Good in alcohol
水分:≤6%
Em (550nm, 0.1M NaOH):>14700
性状:至浅黄色结晶,露光变红。溶于热水和热乙醇,也溶于氢氧化碱、硼砂溶液和甘油,微溶于冷水。溶液贮存时色变深,熔点100~120℃(140℃)。有刺激性。苏木精不能直接染色,必须暴露在通气的地方,使他变成氧化苏木精(又叫苏木素)后才能使用,这叫做“成熟”。苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色力愈强。被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。苏木精是是染细胞核的优良材料,他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。分化时组织所染的颜色因处理的情况而异,用酸恒河猴胚肾细胞;FRhK-4 [FRhK4]图片性溶液(如盐酸—酒精)分化后呈红色,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液(如氨水)分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。遇光变红。 在水溶液中,特别是在碱溶液中易被空气氧化成红棕色的氧化苏木精。
性状:液体
用途:生化研究。核和染色质的染色剂。用不同的媒染剂可得到蓝色或黑色。定性检定铜(II)、铁(III)、钼酸盐、铋(III)和锡(IV)等;光度测定钒、铝、锡(IV)、氟、铌、钽等;墨水制造;酸碱指示剂。pH 5.0(黄)~6.0(紫)、0.0(粉红)~1.0(绿)。
保存:RT,避光
恒河猴胚肾细胞;FRhK-4 [FRhK4]图片培养温馨提示:
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