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非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS2；Vero-HCV-NS2操作步骤
点击次数：147发布时间：2017/11/30 16:48:42
更新日期：2021/11/4 12:25:10
所 在 地：中国大陆
产品型号：
相关标签：ＡＴＣＣ细胞
优质供应
详细内容
细胞名称 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS2；Vero-HCV-NS2操作步骤
形态特性 上皮样细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 Vero-HCV-NS2细胞整合有丙型肝炎病毒的NS2基因，能稳定表达NS2蛋白，是HCV基础研究的极好摸型。它由武汉大学病毒学国家重点实验室郭佳博士于2008年构建并保存。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C10
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS2；Vero-HCV-NS2操作步骤 细胞培养步骤：一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS2；Vero-HCV-NS2操作步骤对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS2；Vero-HCV-NS2操作步骤 注意事项：
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
磷酸化D酪氨酸激酶衰减蛋白1抗体规格:?0.1ml英文名称：phospho-DOK1 (Ser450)
可溶性附着蛋白α-SNAP抗体规格:?0.2ml英文名称：Alpha SNAP
信号转导和转录激活因子4抗体规格:?0.1ml英文名称：STAT4
线粒体铁转运蛋白2抗体规格:?0.2ml英文名称：Mitoferrin 2
肿瘤抑制蛋白18抗体规格:?0.2ml英文名称：ST18
锌指转录蛋白Sall1抗体规格:?0.2ml英文名称：SALL1
锌指转录蛋白Sall4抗体规格:?0.2ml英文名称：SALL4
转录因子SOX17抗体规格:?0.1ml英文名称：SOX17
溴化丙胺太林相关蛋白2抗体规格:?0.2ml英文名称：STOML2
S100钙结合蛋白A8抗体规格:?0.1ml英文名称：S100A8
唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素抗体规格:?0.2ml英文名称：SIGLEC10
唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素1抗体规格:?0.2ml英文名称：Sialoadhesin
转录因子SP3抗体规格:?0.1ml英文名称：SP3
转录因子SP6抗体规格:?0.1ml英文名称：SP6
S0008-1黑色素(醇溶)/酒精元/油溶黑5/醇溶尼格洛辛/精元/胺黑/醇溶黑/醇黑/醇溶苯胺黑/油溶苯胺黑/醇溶黑色素/Nigrosine alcohol soluble，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，CAS:8005-02-5BS25克RT
中文名称： 黑色素(醇溶)
其他中文名称： 酒精元；油溶黑5；醇溶尼格洛辛；精元；胺黑；醇溶黑；醇黑；醇溶苯胺黑；油溶苯胺黑；醇溶黑色素
英文名称： Nigrosine alcohol soluble
其他英文名称： Nigrosin spirit soluble；Nigrosin B spirit soluble；Oil soluble black；C.I. 50415
产品规格： BS
包装：25克
CAS号：8005-02-5
级别：BS
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS2；Vero-HCV-NS2操作步骤生物染色试验：合格
性状：灰黑色到蓝黑色粉末或块状。系由苯胺、盐酸苯胺、硝基苯和铁或铜灼烧至180～200℃而得，或为硝基苯酚(硝基甲酚)、苯胺、盐酸苯胺和铁灼热而成的各种组分。易溶于油酸和硬脂酸，溶于丙酮，溶于汽油呈红紫色，溶于苯呈蓝紫色，溶于乙醇和油脂呈深蓝色。不溶于水。吸收波长565nm。
用途：生化研究。生物染色。中枢神经组织、胰组织、细胞芽胞等的染色
保存：RT
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。
