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细胞名称 恒河猴肾细胞;RM-2图片
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雌性猕猴的肾组织。2004年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 P3
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 B类
恒河猴肾细胞;RM-2图片复苏操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
恒河猴肾细胞;RM-2图片培养温馨提示:
1)公司努力实现为科学研究提供实验细胞技术服务。所提供的实验细胞及其子代,不能用于人体实验和临床诊断、治疗。
2)公司细胞资源中心承诺尽努力对实验细胞资源相关信息进行及时更新。但限于我们的技术条件,中心不保证其准确性。
3)从文献等处引用的信息本中心未进行核实,仅供参考。
4)使用者在接收、处理、保存、丢弃、转让及使用细胞的时候要遵守国内外有关的法律法规,充分考虑可能存在的风险和责任,采取适当的安全和处理措施尽量降低对健康或环境的危害。
恒河猴肾细胞;RM-2图片步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
胸腺素β10抗体规格:?0.1ml英文名称:T Beta 10
细胞粘附分子1抗体规格:?0.1ml英文名称:TSLC1
胸腺基质淋巴细胞生成素-1抗体(人)规格:?0.2ml英文名称:TSLP (human)
甲状腺转录因子-2抗体规格:?0.2ml英文名称:FOXE1
微管蛋白α/Tubulin α抗体规格:?0.1ml英文名称:Tubulin-alpha 1
三碘甲狀腺素T3抗体规格:?0.2ml英文名称:T3
肿瘤坏死因子配体超家族成员12A抗体规格:?0.1ml英文名称:TNFRSF12A
促甲状腺素受体抗体(N端)规格:?0.1ml英文名称:TSHR (NT)
甲状腺核转录因子-1抗体规格:?0.1ml英文名称:TTF1
转钴胺素蛋白2抗体规格:?0.2ml英文名称:TCN2
跨膜蛋白74抗体规格:?0.2ml英文名称:TMEM74
转铁蛋白受体2抗体规格:?0.2ml英文名称:TFR2
肿瘤坏死因子受体超家族成员13B抗体规格:?0.2ml英文名称:TACI
S0017酚红/苯酚红/苯酚磺酰酞/苯酚磺酞/3,3-二(对羟苯基)-3H-2,1-苯并氧硫杂环戊烷-1,1-二氧化物/酚磺酞/酚酞红/Phenol red,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,143-74-8IND25克RT
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,100克
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,500克
,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,ACS级25克
中文名称: 酚红
其他中文名称: 苯酚红;苯酚磺酰酞;苯酚磺酞;3,3-二(对羟苯基)-3H-2,1-苯并氧硫杂环戊烷-1,1-二氧化物;酚磺酞;酚酞红
英文名称: Phenol red
其他英文名称: Phenolsulfonephthalein;3,3-Bis(p-hydroxyphenyl)-3H-2,1-benzoxathiole 1,1-dioxide
产品规格: ACS级
包装:25克
产品规格: IND
包装:25克/100克
CAS号:143-74-8
C19H14O5S=354.38
级别:ACS grade
Visual Transition Interval (pH 6.8-8.2):合格
Solubility (0.1%, Alcohol):合格
级别:IND
pH变色域:1.2(橙)~3.0(黄);6.5(棕黄)~8.0(紫红)
干燥失重:≤1.0%
灼烧残渣:≤0.2%
碱溶解试验:合格
质量吸收系数ε1(λ1,pH 1.2)/(L/cm?g):110.0~123.0
质量吸收系数ε2(λ2,pH 3.0)/(L/cm?g):60.0~68.0
质量吸收系数ε3(λ3,pH 6.5)/(L/cm?g):62.0~72.0
质量吸收系数ε4(λ4,pH 8.0)/(L/cm?g):120.0~135.0
吸收波长λ1(pH 1.2)/(nm):503~506
恒河猴肾细胞;RM-2图片吸收波长λ2(pH 3.0)/(nm):430~435
吸收波长λ3(pH 6.5)/(nm):430~435
吸收波长λ4(pH 8.0)/(nm):557~560
性状:鲜红至深红色结晶或细小结晶性粉末,在空气中稳定。1g溶于约1300ml水、约350ml乙醇、500ml丙酮。易溶于氢氧化碱或碳酸碱溶液中呈红色,与锌粉共沸褪色,几乎不溶于。吸收波长 557(360)nm。有刺激性
用途:生化研究。酸碱指示剂;血液二氧化碳全量测定。细菌血清检验中制备双糖铁尿素培养基的指示剂等
保存:RT