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技术文章
NuSmart®核酸直接释放技术和标准核酸提取技术差别
点击次数：13202 发布时间：2024/3/20 10:48:50
基因组DNA提取作为分子生物学常规技术是每个实验室研究人员熟悉的技术。而想获得基因组DNA只需要将核酸外的结构破坏就能够将核酸释放出来。常见有以下几种方法，包括机械力裂解、酶裂解以及化学裂解。这几种方法的区别见下表：
| 方法 | 机械力裂解 | 酶裂解 | 化学裂解 |
| 原理 | 外力破坏细胞壁和/或细胞膜 | 消化蛋白质结构以及破坏组蛋白的缠绕 | 缓冲液体系中加入去垢剂破坏脂膜并释放内部成分 |
| 优势 | 操作简单、快速 | 无需机械力 | 操作简单 无需其他设备 |
| 劣势 | 多样本时比较耗时 处理过长中产热导致基因组降解 基因组容易断裂 需要研磨设备 | 价格昂贵 耗时
| 释放的抑制物对下游扩增有影响 不适合某些细胞器基因组的获得
|
落实在产品上，实验室标准核酸提取纯化包括有机提取、硅胶柱离心提取、磁珠吸附提取。这几种方法对比如下表：
| 方法 | 有机提取 | 硅胶柱提取 | 磁珠提取 |
| 原理 | 苯酚-lvfang抽提和离心进行分离和纯化 | 通过机械力和/或酶裂解释放核酸，硅胶柱与其形成静电吸附，通过离心和盐粒子洗涤进行分离纯化 | 通过机械力和/或酶裂解释放核酸，带电磁珠与其吸附，在磁场作用下进行分离纯化 |
| 样品 | 细胞、组织、植物等 | 所有样品类型 | 所有样品类型 |
| 纯度 | 中 | 高 | 高 |
| 通量 | 低通量 | 中通量 | 高通量 |
| 优势 | 充分裂解 价格便宜 特别适合难处理样本 | 操作方便 产量和纯度都高 可处理多种样本 | 产量高 不会堵塞 可设备自动化操作 |
| 劣势 | 使用有毒有害化学试剂 不易购买 | 容易堵塞 产量有上限 | 不利于微量样本操作 |
| 耗时 | 30-60分钟 | 30-60分钟 | 30分钟 |
通过对比发现以上方法操作复杂、费时费力且危险，为了解决这一问题，我们推荐NuSmart®核酸直接释放技术。该方法只需要5分钟，不同温度环境下，无需重复训练即可完成核酸直接释放。结合下游开发试剂盒，能够满足常规分子生物学实验室的需求。
| 方法 | NuSmart®核酸直接释放技术 | 标准/传统核酸提取法 |
| 原理 | 通过利试剂破坏细胞壁/膜和细胞核膜，可以释放基因组DNA。特殊纳米材料提高PCR灵敏度 | 通过机械力和/或酶裂解细胞释放核酸，硅胶柱等材料与其吸附，通过离心/磁场作用进行提取纯化 |
| 样品 | 任何样本类型 | 任何样本类型 |
| 样品量 | 细胞：1-103个 组织：1-2mm 植物叶片：1-4mm 微生物培养液：10uL | 细胞：＞106个 组织：＞10mg 植物叶片：＞100mg 微生物培养液：0.5-1mL |
| 耗时 | 5分钟 | 30-60分钟 |
| 通量 | 高通量 | 硅胶柱法：中通量 磁珠法：高通量 |
| 优势 | 对于小量和微量样本十分友好 操作简单，无需训练 基因组完整性好 无酶、无有机试剂 无大型设备投入 |
操作方便 产量高 纯度高 |
| 劣势 |
| 基因组容易断裂 操作步骤多、费时 需要设备 |
原创作者：上海创凌生物科技有限公司
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