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技术文章
为什么NuSmart®核酸直接释放技术有优势? ——PCR兼容强
点击次数:7573 发布时间:2024/5/15 16:12:05
——PCR兼容强
核酸直接释放技术市场上有同类产品么?答案是毋庸置疑的,但是从兼容性和PCR扩增效率来说NuSmart®系列目是强的。先我们看下NuSmart®系列能够处理什么样品,见表1。而其他同类产品并非广谱型,可能货号A只针对哺乳动物样本,货号B可针对植物样本,甚至有些试剂盒还需要区分多糖多酚样本。
来源 | 范围 |
细胞 | 293T、A549、Vero、PK15、Sp2/0、HCT-116、Marc145、ST、siHa、MCF-7 |
人 | 头发、唾液、咽拭子、全血、精液、肿瘤切片 |
小鼠 | 心、肝、脾、肺、肾、脑、脊柱、胃、大肠、小肠、胆囊、尾巴、脚趾、皮、耳朵、肌肉、EDAT 抗凝血、肝素钠抗凝血、枸橼酸钠抗凝血 |
猪/鸡/羊 | 心、肝、脾、肺、肾、淋巴结、精液、全血、血清 |
亚洲鲫鱼 | 鱼鳍、鱼泡、鱼鳞、鱼籽 |
病毒 | ASFV、PRV、PPV、PCV |
细菌 | 金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、农杆菌、结核杆菌、粪肠球菌、链球菌 |
真菌 | 酵母菌、曲霉菌、犬小孢子菌、口蘑、平菇、白木耳 |
植物
| 烟草、拟南芥、油菜、水稻、大豆、玉米、小麦、棉花、百脉根、西红柿、土豆、茄子、胡萝卜、龙眼、荔枝、苹果、香蕉、葡萄 |
中草药 | 铁皮石斛、丹参、益母草、红花、紫草、苦参、艾叶、灵芝、麦冬、金银花、淫羊藿、茯苓、苍术、白术、百合、半夏 |
其他微生物 | 支原体、衣原体、螨虫、跳虫 |
图1:经过NuSmart®系列试剂盒验证样本来源。
常见的核酸直接释放技术的配方包含有高浓度去垢剂、金属离子、高盐离子、蛋白酶、高糖多酚等。在核酸释放过程中以上试剂都能够增强样本的处理能力从而使核酸大量的释放。但是下游PCR扩增应用中会出现扩增效率下降甚至无条带的情况。主要是因为PCR扩增过程中收到以上抑制物的影响,见表2。此时可以更换聚合酶改善此问题,但是也增加了扩增成本。这个时候使用NuSmart®系列试剂盒不用为此担心,整个体系经过多重样本验证,具有超强的兼容性。NuSmart®系列广谱型核酸释放剂含有温和变性剂(不含有SDS、DTT等)、不含有任何生物酶(例如蛋白酶K、破壁酶等)、两种高分子材料按照不同浓度配合使用、不含有任何有机试剂(例如lvfang、苯酚、无水乙醇等)大程度吸附PCR抑制物。轻松自如的PCR扩增。
来源 | 抑制剂 |
血液、肌肉组织 | 肝素、血红蛋白、免疫球蛋白、蛋白酶、核酸酶、阿昔洛韦、激素、IgG、乳铁蛋白、肌红蛋白、胶原蛋白 |
牛奶 | 蛋白酶、钙离子 |
粪便 | 胆汁盐、复合多糖、脂类、尿酸盐 |
植物 | 果胶、多酚、 多糖、木聚糖、叶绿素 |
土壤 | 黄腐酸、腐殖酸、腐殖物质、金属离子、多酚 |
样品准备 | KCL、SDS、二甲苯 |
DNA纯化 | 盐离子、乙醇、异丙醇、苯酚、乙酸钠 |
非洁净塑料制品 | 蛋白酶、核酸酶 |
图2:常见PCR抑制物清单
NuSmart®核酸直接释放适合已验证清单
产品名称 | 应用场景 | 货号 |
NuSmart®小鼠组织PCR试剂盒Plus | 转基因小鼠检测 | Nu-M01 |
NuSmart®细胞和组织PCR试剂盒Plus | 针对哺乳动物细胞和各类动物组织,无需采集大量样本,不需离心,一步达成 | Nu-C01 |
NuSmart®植物组织PCR试剂盒 | 兼容低多糖多酚和高多糖多酚样本,无需液氮研磨,无需采集大量样本 | Nu-P01 |
NuSmart®血液PCR试剂盒 | 抗凝血、血浆、血清快速释放DNA,无需大量样本 | Nu-B01 |
NuSmart®微生物PCR试剂盒 | DNA病毒、酵母、细菌、霉菌、藻类样本不需扩大培养,仅需10μL就能够获得PCR结果 | Nu-Mi01 |
NuSmart®GMO快速PCR试剂盒 | 无需液氮、无需离心、无需有机试剂,快速、高通量检测转基因样本 | Nu-GMO01 |
NuSmart®单细胞PCR试剂盒 | 显微细胞挑取仪获取的单个细胞或流式细胞仪获取的微量细胞进行基因组扩增 | Nu-SCD01 |
NuSmart®精子PCR试剂盒 | 5分钟获得微量精液中基因组DNA,无需采集大量样本,不需离心,一步达成 | Nu-SPERM01 |
NuSmart®噬菌体PCR试剂盒 | 快速释放噬菌体中DNA,无需大量繁殖,仅需10μL就能够获得PCR结果 | Nu-PH01 |
原创作者:上海创凌生物科技有限公司