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技术文章
NuSmart®核酸直接释放技术应用在水稻中的操作流程
点击次数:12 发布时间:2024/9/3 9:56:55
水稻是我国重要的粮食作物。受限于人口压力,可耕种面积减少以及自然灾害等压力,培育高产抗病虫害的水稻品种是提高水稻产量的重要环节。随着基因编辑技术的快速发展,分子生物学技术渗透到农业育种的方方面面。所以转基因指标的检测,分子标记育种等手段都需要进行基因组DNA检测。但是面对大量待筛选样本,例如叶片、种子等,就目实验室提取基因组DNA的技术手段而言效率太低。无论是使用CTAB法还是硅胶柱提取法,光液氮研磨就占据了工作量的一般,从而使整个提取纯化过程费时费力。从而大大降低了实验室研究人员的积性。
从经济角度考虑,目应用于水稻中提取基因组DNA的方法主要为CTAB法。该方法局限性很大,例如取材量大、液氮研磨、步骤多、提取时间长、使用不易购买的有毒有害试剂,反复离心,且无法高通量操作。随着田间出样量逐年增加,该方法已经不能满足实验室需求,我司开发的NuSmart®转基因水稻快速PCR试剂盒一次性解决以上痛点问题。
—对样本量要求低、微量(1-4mm叶片)
—操作简单快速(5分钟释放基因组DNA)
—室温处理
—不用液氮研磨
—不用离心
—不使用生物酶,如蛋白酶K
—不使用有毒有害有机试剂
操作流程
案例A 不同生长时间采集水稻叶片扩增2个基因
1、幼苗期 2、插秧期 3、分蘖期 4、拔节期
使用NuSmart®转基因水稻快速PCR试剂盒(货号Nu-GR01)处理幼苗期、插秧期、分蘖期、拔节期叶片,2×GMO Mix扩增2个不同长度基因,分别为482bp(基因1)和134bp(基因2)。
案例B 水稻不同大小叶片扩增2个基因
幼苗期叶片长度1:1mm 2:2mm 3:3mm 4:4mm
成熟期叶片直径1:1mm 2:2mm 3:3mm 4:4mm
使用NuSmart®转基因水稻快速PCR试剂盒(货号Nu-GR01)处理幼苗期和成熟期叶片,2×GMO Mix扩增2个不同长度基因,分别为482bp(基因1)和134bp(基因2)。
案例C 水稻不同部位样品扩增2个基因
1、叶片 2、茎 3、根 4、花蕊 5、种子
使用NuSmart®转基因水稻快速PCR试剂盒(货号Nu-GR01)处理根、茎、叶、花蕊、种子,2×GMO Mix扩增2个不同长度基因,分别为482bp(基因1)和134bp(基因2)。
原创作者:上海创凌生物科技有限公司