Biozellen®鼠尾胶原蛋白Ⅰ型溶液

货号         B-P-00001

规格    10mg、20mg 、50mg、100mg

保存条件      4℃、2年

产品明细

应用

Biozellen® Collagen I 是二维环境中表面薄涂层的理想选择； 它促进各种细胞类型的细胞粘附，例如肝细胞、成纤维细胞、脊髓神经节、肌肉细胞、雪旺氏细胞、上皮细胞； 涂层胶原蛋白 I 可用于研究肿瘤细胞的侵袭、迁移和巨噬细胞、单核细胞的趋化性。

胶原 I 3D 凝胶类似于动物细胞外基质 在 3D 体外配置中的培养，与2D培养不同的是3D培养可以提供仿生物微环境可以操纵凝胶强度来影响 3D 培养中的细胞迁移；允许您研究 ECM 的变化对细胞发育、趋化性、迁移和形态的影响。

注意

胶原蛋白产品在操作与制备过程中，需保持无菌环境。

建议胶原蛋白与其他配制溶液要预行预冷，操作过程中在冰上进行制备。

涂覆程序

注意：使用这些建议作为指导，以确定您的培养系统的佳包被条件。

1. 如果需要，将所需体积的胶原蛋白溶液从瓶子中转移到稀释容器中。 使用无菌 0.01 N HCl 溶液进一步稀释至所需浓度。

2.温和摇动胶原混合物直至材料完全混匀。

3.将稀释的胶原材料添加到培养表面，确保整个表面都被覆盖。 （建议：5 μg/cm2）

4.室温孵育，盖上盖子，1小时。

5. 孵育后，吸出所有剩余材料，直至表面干燥。

6.用无菌培养基或1X PBS仔细冲洗涂层表面，避免刮伤表面。

7.涂层表面准备好即可使用； 可以在 2-8°C无菌条件下储存长达一周。

一般的 3-D 凝胶制备程序

注意：I 型胶原蛋白凝胶的特性取决于制备过程中的多种因素，例如温度、pH 值和胶原蛋白浓度。

1. 将无菌 10X PBS、无菌 1N NaOH、无菌 dH2O、Biozellen® Collagen I 和无菌试管置于冰上。

2.确定终体积和终胶原蛋白浓度。 （建议浓度：0.5 - 3mg/ml）

3.计算如下：

4.执行以下步骤：

(a) 在试管中加入 10X PBS。

(b) 在 10X PBS 中加入 1N NaOH 调节 pH 值。

(c) 将 dH2O 添加到 10X PBS/1N NaOH 中以匹配终体积，混合复合物并置于冰中。

(d) 将 Biozellen®Collagen I 加入试管中，彻底混合无气泡并置于冰上直至准备使用。

5.凝胶，将溶液无菌转移到细胞培养装置中，放入37℃培养箱30 分钟。

含有培养基的 3-D 凝胶制备程序

对于使用培养基的 3D 凝胶系统进行细胞培养，建议使用以下方案。

1. 将无菌 10X 培养基、无菌 1N NaOH、Biozellen® Collagen I、无菌 1X 培养基（含或不含细胞）和无菌试管置于冰上。

2. 选择性添加，如果10X 培养基中的成分不包含 NaHCO3， 则应另外添加无菌的 NaHCO3 缓冲液（依据 10X 培养基操作步骤），并放在冰上。

3.确定终体积和终胶原蛋白浓度。 （建议浓度：0.5 - 3mg/ml）

4. 确定 3D 凝胶中的终细胞浓度。 （建议：105 ~ 107 个细胞/毫升）

5.使用以下公式计算内容物的体积。

6.执行以下步骤：

(a) 将 10X 培养基加入管中。

(b) 在同一管中加入 1N NaOH。

(c) 如果不含 NaHCO3，则添加额外的缓冲液。

(d) 将计算过体积的Biozellen® Collagen I胶原蛋白加入试管中充分混合，不 要产生气泡，并将其放在冰上直至准备使用。 (注意： 请尽快使用含有胶原蛋白的混合物，因为从 5 分钟左右部分凝胶开始凝固。)

(e)将含有悬浮细胞的 1x 培养基添加至装有上述溶液的试管中，并置于冰上。

7.为了胶尽快凝固，请将装有上述溶液的试管转移到培养箱，并在 37℃, 5% CO2 的培养箱中放置 30 分钟。

计算公式：