K-604 dihydrochloride

MCE 站：K-604 dihydrochloride

品牌：MedChemExpress (MCE)

CAS：217094-32-1

纯度：≥99.0%

货号：HY-100400A

存储条件：4°C，密封保存，远离潮湿 *溶剂中：-80°C，2年；-20°C，1年（密封保存，远离潮湿）

运输条件：美国大陆的室温；其他地方可能有所不同。

产品活性：K-604 dihydrochloride 是一种有效的选择性酰基辅酶 A：胆固醇酰基转移酶 1 (ACAT-1) 抑制剂，IC50 为 0.45±0.06 μM。

体外：检查了 K-604 对人类 ACAT-1 和 ACAT-2 的效力和选择性。K-604 对人类 ACAT-1 的 IC50 值为 0.45 μM，对人类 ACAT-2 的 IC50 值为 102.85 μM，表明 K-604 对 ACAT-1 的选择性比对 ACAT-2 的选择性高 229 倍。动力学分析表明，抑制作用与油酰辅酶 A 具有竞争性，Ki 值为 0.378 μM。K-604 有效抑制人类巨噬细胞中的胆固醇酯化，IC50 值为 68 nM[1]。在无细胞生化测定中，0.5 M 的 K604 可抑制 70% 的 ACAT1 酶活性，而不会显著抑制 ACAT2 酶活性。为了研究阻断 ACAT1 是否会增加神经元细胞的自噬，用 K604 处理 N2a 细胞。结果表明，浓度为0.1至1 M时，K604可抑制60-80%的ACAT活性。然后将浓度为0.1至1 M的K604加入N2a细胞中，作用24小时后，用Western blot检测LC3水平。结果表明，K604以剂量依赖性方式增加了LC3-II/LC3-I比率（自噬体形成的可靠标志）。K604处理后，N2a细胞中荧光LC3点的数量显著增加。Western blot显示，K604显著降低了N2a细胞中p62的水平[2]。MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。

体内：使用 F1B 仓鼠（一种易患饮食诱发的高脂血症和动脉粥样硬化的动物模型）评估 K-604 对主动脉病变区域和血浆胆固醇水平的影响。K-604 的给药不会影响体重或食物消耗。脂肪喂养的仓鼠的血浆胆固醇水平比普通饲料喂养的仓鼠高约 12 倍，K-604 仅在测试剂量（30 mg/kg）下显著降低血浆胆固醇水平，但在较低剂量（1-10 mg/kg）下没有降低。高脂饮食显著诱导油红 O 染色的脂肪条纹病变，而 K-604 可显著减少这种病变。此外，还对动脉粥样硬化病变进行了组织学分析。对照组的脂肪条纹病变以内皮下空间中泡沫巨噬细胞的积聚为特征。相反，使用K-604[1]后，泡沫巨噬细胞所占面积明显减少。MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。

动物实验：仓鼠[1] 8周龄雄性F1B仓鼠（n=30）用于动物实验。动物房温度控制在23±3°C，相对湿度控制在50±20%。动物以CE-2饲料喂养，随后补充含有0.3%胆固醇和10%椰子油的CE-2，持续10周。在脂肪负荷期间，K-604以1、3、10或30 mg/kg/天口服给药（每个剂量组n=6）。对照组（n=6）接受0.5%甲基纤维素水溶液代替K-604。自来水随意提供。给药时测量体重。使用市售试剂盒（胆固醇E-Test）采集血液样本以测定血浆胆固醇水平。MCE尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

细胞实验：小鼠神经母细胞瘤细胞系 N2a 在含有 10% 胎牛血清 (FBS) 的 DMEM/Opti-MEM (50:50) 中培养，培养温度为 37°C，CO2 为 5%，培养箱为加湿培养箱。细胞与 ACAT1 特异性抑制剂 K604 (0.1、0.5 和 1 M) 或同种型非特异性 ACAT 抑制剂 CI-1011 一起孵育 24 小时。从出生后 0-3 天的小鼠脑中分离原代皮质神经元。皮质神经元以 350,000 个细胞/孔接种在 6 孔板中，并在含有 1×B27、0.5 mM L-谷氨酰胺和 5 ng/mL 成纤维细胞生长因子的 2 mL/孔 Neurobasal A 中生长。每 7 天将一半培养基更换为新鲜培养基。培养 14-21 天后，细胞用于单独实验[2]。 MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

激酶实验：ACAT 活性是通过测量胆固醇[14C]油酸酯的产生来确定的。来自 CHO-ACAT-1 或 CHO-ACAT-2 细胞的微粒体级分用 0.5 M KCl、0.5 mM EDTA 和 25 mM Tris-HCl (pH 7.8) (缓冲液 A) 中的 CHAPS 稀释至*终蛋白质浓度为 1.0 mg/mL。将 10 μL 缓冲液 A 中含有 9.2 μg 蛋白质（对于 ACAT-1）或 4.9 μg 蛋白质（对于 ACAT-2）的微粒体部分与 5 μL DMSO 中不同浓度的 K-604（0.4、0.6 和 0.8 μM）或 CI-1011 混合，然后用 152.5 μL 混合胶束重构，其中混合胶束含有 1.6 mM 胆固醇、11.2 mM 磷脂酰胆碱和 9.3 mM 牛磺胆酸（溶于 25、0.5 mM EDTA 和 Tris-HCl（pH 7.8））。反应开始于加入 10 μL 0.45 μM [14C]油酰辅酶 A、10 nM 无脂肪酸牛血清白蛋白 (无脂肪酸 BSA) 和 25 mM Tris-HCl (pH 7.8)。反应混合物在 37°C 下孵育 25 分钟，然后加入 150 μL 氯仿/甲醇 (2:1) 终止反应。有机相在氮气流下干燥。用 150 μL 氯仿/甲醇 (2:1) 重新悬浮脂质，并使用己烷/乙醚/乙酸 (75:25:1) 通过薄层色谱法 (TLC) 进行显影。胆固醇 [14C] 油酸酯的放射性用 BAS 2500 图像分析仪 [1] 测定。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

IC50 & Target：ACAT-1 0.45 μM (IC50) ACAT-2 102.85 μM (IC50)

参考文献：

[1]. Ikenoya M, et al. A selective ACAT-1 inhibitor, K-604, suppresses fatty streak lesions in fat-fed hamsters without affecting plasma cholesterol levels. Atherosclerosis. 2007 Apr;191(2):290-7.[2]. Shibuya Y, et al. Acyl-coenzyme A:cholesterol acyltransferase 1 blockage enhances autophagy in the neurons of triple transgenic Alzheimer＇s disease mouse ａnd reduces human P301L-tau content at the presymptomatic stage. Neurobiol Aging. 2015 Jul;36(7):2248-2259.

品牌介绍:
•   MCE (MedChemExpress) 拥有200 多种全球独家化合物库，我们致力于为全球科研客户提供前沿*全的高品质小分子活性化合物；
•   50,000 多种高选择性抑制剂、激动剂涉及各热门信号通路及疾病领域；
•   产品种类涵盖各种重组蛋白，多肽，常用试剂盒，更有 PROTAC、ADC 等特色产品，广泛应用于新药研发、生命科学等科研项目；
•   提供虚拟筛选，离子通道筛选，代谢组学分析检测分析，药物筛选等专业技术服务；
•   设有专业的实验中心和严格的质控、验证体系；
•   提供 LC/MS、NMR、HPLC、手性分析、元素分析等各项质检报告，确保产品的高纯度、高品质；
•   产品的生物活性多经各国客户实验验证；
•   Nature, Cell, Science 等多种期刊及制药收录了MCE客户的科研成果；
•   专业团队跟踪*新的制药及生命科学研究进展，为您提供全球*新的活性化合物；
•   与世界各大制药公司及知名科研机构建立了长期的合作。