HC-030031

MCE 站：HC-030031

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-15064

CAS：349085-38-7

纯度：99.97%

存储条件：Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month

运输条件：美国大陆的室温；其他地方可能有所不同。

产品活性：HC-030031 是一种有效的选择性的 TRPA1 抑制剂，拮抗 AITC 和福尔马林诱发的钙流入，IC50 分别为 6.2±0.2 和 5.3±0.2 μM。

体外：无论使用何种激动剂，HC-030031 都以相似的效力可逆地阻断 TRPA1 电流；这包括阻断由可逆激动剂 (如 AITC) 或不可逆激动剂 (如 N-甲基马来酰亚胺) 引起的电流。HC-030031 阻断 N-甲基马来酰亚胺激活 TRPA1，后者通过半胱氨酸修饰不可逆地打开通道。HC-030031 不会阻断由 TRPV1、TRPV3、TRPV4、hERG 或 NaV1.2 通道介导的电流[1]。HC-030031 相对于肉桂醛或异硫氰酸烯丙酯 (AITC 或芥子油) 诱导的 TRPA1 激活的效力分别为 4.9 和 7.5 μM (IC50)。这些发现与之前报道的 6.2 μM 的 IC50 对 TRPA1 的 AITC 激活相似。使用稳定表达人 TRPA1 的 HEK-293 细胞在 FLIPR 钙流入测定中测试 HC-030031 阻断 TRPA1 激活的能力。在添加 EC60 浓度的肉桂醛或 AITC 之前，将浓度为 0.3 至 60 μM 的 HC-030031 与细胞一起孵育 10 分钟。HC-030031 以剂量依赖性方式阻断肉桂醛和 AITC 诱导的钙内流，IC50 值分别为 4.9 和 7.5 μM[2]。 MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。

体内：将 AITC (10%; 50 μL) 注射到大鼠后爪后，HC-030031 (300 mg/kg) 在前 5 分钟内显著减少退缩。在一小时的剩余时间内，HC-030031 降低了退缩频率，这一结果反映了在福尔马林引起的退缩中观察到的效果[1]。在大鼠中，口服 HC-030031 以 100 mg/kg 的剂量减少 AITC 诱导的伤害性行为。此外，口服 HC-030031 (100 mg/kg) 显著逆转完全弗氏佐剂 (CFA) 诱导的炎症性疼痛的更慢性模型和神经性疼痛的脊神经结扎模型中的机械超敏反应。口服给药后 1 小时，HC-030031 显著缩短了注射 1% AITC 后的提升持续时间 (p[2]。HC-030031 完全逆转发炎小鼠中增强的机械放电[3]。 MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。

动物实验：所有实验均使用雄性 Sprague-Dawley 大鼠 (200-500 g)。使用 HC-030031 (100, 300 mg/kg)。对于所有实验，HC-030031 悬浮于 0.5% 甲基纤维素中，并以 10 mL/kg 的体积口服给药。将萘普生 (20 mg/kg) 溶解于无菌水中，口服给药，作为 CFA 实验的阳性对照。将普瑞巴林 (20 mg/kg) 溶解于无菌水中，口服给药，作为神经性疼痛实验的阳性对照。使用成年雄性 C57BL/6 小鼠 (8-12 周龄)。将 30 L 未稀释的 CFA 乳液注射到小鼠左足底后爪内侧。载体对照组注射 30 L 无菌 0.9% 盐水溶液。注射两天后，在超敏反应达到高峰时，使用数字卡尺 (VWR) 测量后爪中点的炎症程度。在一个实验中，在 CFA 注射后 2 天将膜不通透性钠通道抑制剂利多卡因 N-乙基溴（也称为 QX-314，（0.2% 盐水；30 L）与或不与 TRPA1 激动剂肉桂醛 (30 M) 一起注射到左后爪跖部。在另一个实验中，在 CFA 注射后 2 天将 TRPA1 拮抗剂 HC-030031（100 g 溶于 30 L 0.5% DMSO 和 0.25% Tween-80 的 PBS 溶液中）注射到左后爪跖部。载体对照用 30 L 0.5% DMSO 和 0.25% Tween-80 的 PBS 溶液注射。所有行为分析均在注射 QX-314、HC-030031 或载体后 1 至 4 小时内完成。MCE 尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

细胞实验：在测定前 24 小时，将稳定表达人类 TRPA1 的 HEK-293 细胞以 20,000 个细胞/孔的密度接种到 384 孔板中。在测定当天，将细胞在室温下加入 4 μM Fluo-4 染料和 0.08% 普卢兰酸，在由 Hank 平衡盐溶液（补充有 20 mM HEPES、2.5 mM 丙磺舒和 4% TR-40）组成的测定缓冲液中孵育 1 小时。使用荧光成像板读取器 (FLIPR) TETRA 进行钙流入测定。在拮抗剂测试之前，为 TRPA1 激动剂肉桂醛和 AITC 生成浓度-反应曲线，以便确定 EC60 浓度。HC-030031 的滴定由 DMSO 原液制成，在测定中将 DMSO 保持为 0.4% 的常数。将拮抗剂与细胞一起孵育 10 分钟，然后加入 EC60 浓度的肉桂醛（18 μM）或 AITC（6 μM），并再监测钙流入 10 分钟[2]。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

IC50 & Target：TRPA1[1]

参考文献：

[1]. McNamara CR, et al. TRPA1 mediates formalin-induced pain. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007 Aug 14;104(33):13525-30. [2]. Eid SR, et al. HC-030031, a TRPA1 selective antagonist, attenuates inflammatory- ａnd neuropathy-induced mechanical hypersensitivity. Mol Pain. 2008 Oct 27;4:48. [3]. Lennertz RC, et al. TRPA1 mediates mechanical sensitization in nociceptors during inflammation. PLoS One. 2012;7(8):e43597. [4]. Miyake T, et al. Cold sensitivity of TRPA1 is unveiled by the prolyl hydroxylation blockade-induced sensitization to ROS. Nat Commun. 2016 Sep 15;7:12840. [5]. So K, et al. Hypoxia-induced sensitisation of TRPA1 in painful dysesthesia evoked by transient hindlimb ischemia/reperfusion in mice. Sci Rep. 2016 Mar 17;6:23261.

品牌介绍:
•   MCE (MedChemExpress) 拥有200 多种全球独家化合物库，我们致力于为全球科研客户提供前沿*全的高品质小分子活性化合物；
•   50,000 多种高选择性抑制剂、激动剂涉及各热门信号通路及疾病领域；
•   产品种类涵盖各种重组蛋白，多肽，常用试剂盒，更有 PROTAC、ADC 等特色产品，广泛应用于新药研发、生命科学等科研项目；
•   提供虚拟筛选，离子通道筛选，代谢组学分析检测分析，药物筛选等专业技术服务；
•   设有专业的实验中心和严格的质控、验证体系；
•   提供 LC/MS、NMR、HPLC、手性分析、元素分析等各项质检报告，确保产品的高纯度、高品质；
•   产品的生物活性多经各国客户实验验证；
•   Nature, Cell, Science 等多种期刊及制药收录了MCE客户的科研成果；
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•   与世界各大制药公司及知名科研机构建立了长期的合作。