Anti-Flag 磁珠

MCE 站：Anti-Flag Magnetic Beads (1 μm)

品牌：MedChemExpress (MCE)

货号：HY-K0207A

产品活性：MCE Anti-Flag 磁珠 (1 μm) 可用于细菌和哺乳动物细胞裂解物以及体外表达系统中 Flag 标记蛋白的免疫沉淀（IP）实验，也可用于免疫共沉淀 (Co-IP) 和小量的蛋白质纯化实验。

操作流程：1. 抗原样品制备根据不同的样品选择合适的处理方法2. 磁珠预处理混悬 Anti-Flag 磁珠 (1 μm) ，取 10 μL 磁珠，置于 1.5 mL EP 管中，加入 500 μL 洗涤缓冲液，充分混悬，置于磁力架上磁性分离，弃上清。重复以上洗涤步骤 2 次。3. 样品的结合在上述分离得到的磁珠中加入 500 μL 细胞裂解液，充分混悬，置于翻转混合仪孵育，室温孵育 2 小时或者 4℃ 条件下孵育过夜。置于磁力架上磁性分离，弃上清。注：结合过程中，磁珠可能会出现聚团或呈片状，属于正常现象，不会影响实验结果。4. 洗涤在上述分离得到的磁珠中加入 500 μL 洗涤缓冲液，充分混悬磁珠，磁性分离，弃上清。重复以上洗涤步骤 3 次，直到洗涤后的上清液中 OD280 小于0.05 为止。注：如上清液的 OD280 大于 0.05，适当增加洗涤次数即可。5. 洗脱本说明书提供三种 Flag 标签蛋白洗脱方案，操作者可以根据后期检测的需要选择不同的洗脱方案。1) 变性洗脱法：此方法洗脱的样品适用于 SDS-PAGE 检测。步骤：分离磁珠，弃上清，向磁珠中加入 50 μL 的 1× SDS-PAGE Loading Buffer 混合均匀，95°C 加热 5 分钟。分离磁珠，收集上清至新的 EP 管，进行 SDS-PAGE 检测。2) 酸性洗脱法：此方法洗脱的样品保持原有生物活性，可用于后期功能分析。步骤：分离磁珠，弃上清，向磁珠中加入 50 μL 的洗脱缓冲液 A 混合均匀，室温孵育 10 分钟。分离磁珠，收集上清至新的 EP 管，按每 50 μL 洗脱液加入 25 μL 中和缓冲液的比例加入中和缓冲液，将洗脱产物 pH 调节至中性，样品用于后期功能分析。3) 竞争性洗脱法：此方法洗脱的样品保持原有生物活性，可用于后期功能分析。步骤：分离磁珠，弃上清，向磁珠中加入 3-5 倍磁珠体积的洗脱缓冲液 B 混合均匀，室温孵育 1 小时或者 4°C 条件下孵育 1-2 小时。分离磁珠，收集上清至新的 EP 管，即为目的蛋白，样品用于后期功能分析。

品牌介绍:
•   MCE (MedChemExpress) 拥有200 多种全球独家化合物库，我们致力于为全球科研客户提供前沿*全的高品质小分子活性化合物；
•   50,000 多种高选择性抑制剂、激动剂涉及各热门信号通路及疾病领域；
•   产品种类涵盖各种重组蛋白，多肽，常用试剂盒，更有 PROTAC、ADC 等特色产品，广泛应用于新药研发、生命科学等科研项目；
•   提供虚拟筛选，离子通道筛选，代谢组学分析检测分析，药物筛选等专业技术服务；
•   设有专业的实验中心和严格的质控、验证体系；
•   提供 LC/MS、NMR、HPLC、手性分析、元素分析等各项质检报告，确保产品的高纯度、高品质；
•   产品的生物活性多经各国客户实验验证；
•   Nature, Cell, Science 等多种期刊及制药收录了MCE客户的科研成果；
•   专业团队跟踪*新的制药及生命科学研究进展，为您提供全球*新的活性化合物；
•   与世界各大制药公司及知名科研机构建立了长期的合作。