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Maribavir_GW257406X

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品牌名称:MedChemExpress(进口品牌)型号: 原产地:中国大陆 发布时间:2018/7/25更新时间:2024/1/2

产品摘要:Maribavir 是一种有效抑制野生型 pUL97 催化的组蛋白磷酸化,IC50 为 3 nM。Maribavir 可有效作用于 HCMV 和 Epstein-Barr 病毒 (EBV)

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Maribavir是一种有效抑制野生型pUL97催化的组蛋白磷酸化,IC50为3 nM。Maribavir可有效作用于HCMV和Epstein-Barr病毒(EBV)

体外

Maribavir是野生型自身磷酸化的有效抑制剂,所有主要的更昔洛韦(GCV)抗性UL97突变体均被分析,平均IC50为35 nM。M460I突变导致对Maribavir的超敏反应,IC50为4.8 nM。UL97(L397R)的Maribavir抗性突变体作为Ganciclovir激酶和蛋白激酶(约10%的野生型水平)功能受损。酶动力学实验表明,Maribavir是ATP的竞争性抑制剂,Ki为10 nM[1]。Maribavir(1263W94)以剂量依赖性方式抑制病毒复制,通过多周期DNA杂交测定法测得IC50为0.12±0.01μM。maribavir强烈抑制pUL97蛋白激酶,在3 nM时发生50%抑制

激酶测定

使用递增浓度的ATP(2μM至20μM)对纯化的野生型和突变体UL97蛋白质种类进行酶动力学分析。将掺入的放射性标记的磷酸盐的量相对于Lineweaver Burke图中的ATP浓度作图,以确定每种UL97物种的ATP的Km。Maribavir对野生型或突变体UL97的放射性标记磷酸盐掺入率的影响通过蛋白激酶测定在如上所述的固定浓度的马瑞异韦(0.5μM)或增加的马立那韦浓度(0.01μM至5.0μM)下测定。确定每种UL97物种的Maribavir的IC50。为了确定由Maribavir介导的抑制的性质,构建了具有增加的Maribavir浓度的1/v对1/ATP的图。如果线族在1/Vmax处在y轴上聚集,则竞争抑制是明显的。添加马里巴韦引起的斜率变化用于计算Ki[1]。MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

细胞分析

将Maribavir(1263W94)溶解于DMSO中并储存,然后在使用前用适当的培养基稀释[2]。

对于这些研究,将MRC-5细胞以~5×10 4个细胞/孔接种在24孔板中,并在MEM 8-1-1中生长3天至汇合(~1.1×10 5个细胞/孔)。用MEM1-1-1中的AD169以1至3的MOI感染细胞,并在37℃下孵育90分钟以允许病毒吸附。除去未吸附的病毒并用1mL MEM 2-1-1替换。为了测试化合物对病毒DNA合成或成熟的影响,将Maribavir,BDCRB或GCV以每个实验所示的浓度添加到培养基中[2]。MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考
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