联系方式：
AZD8186_PI3K，AZD8186是一种PI3K抑制剂，抑制PI3Kβ(IC5050=4 nM)，PI3Kδ(IC5050=12 nM)，PI3Kα(IC50=35 nM)和PI3Kγ(IC50=675 nM)

体外

AZD8186是PI3Kβ的有效抑制剂，与PI3Kδ同种型相比具有额外的活性。AZD8186的紧密结合动力学意味着生化分析低估了PI3K的绝对选择性特征。在广泛的蛋白质和脂质激酶测定中，对于74种蛋白质和脂质激酶，PI3Kβ和δ的选择性>100倍。在10μM时，AZD8186在KinomeScan筛选中与442种其他激酶没有显着结合。AZD8186显示PI3K家族激酶的选择性，未检测到其他脱靶活性。在PTEN-无效系中，MDA-MB-468 AZD8186抑制pAKT（Ser473）的PI3Kβ依赖性激活，IC50值为3nM。PIK3CA突变体系BT474c的效力为752nM，表明PI3Kβ对PI3Kα的选择性。IgM介导的B细胞刺激通过激活PI3Kδ导致AKT的磷酸化。AZD8186抑制IgK刺激的JEKO细胞中pAKT（Ser473）激活的磷酸化，IC5​​0值为17 nM。在细胞增殖测定中，AZD8186抑制MDA-MB-468细胞的增殖，GI50值为65nM，IgM刺激JEKO细胞生长，IC50值为228nM。它仅抑制BT474c细胞生长，IC50值为1.981μM，与PI3Kβ对PI3Kα的选择性一致

体内

为了评估AZD8186在体内的单药效力，在PTEN无效的TNBC模型HCC70和MDA-MB-468以及前列腺模型PC3和HID28中评估抗肿瘤活性。每天两次50和25 mg/kg，AZD8186抑制所有四种模型的生长。在25和50 mg/kg时，HCC70分别被抑制在62％（P<0.001）和85％（P<0.001），MDA-MB-468被抑制在47％（P<0.001）和76％（P<0.001），分别在研究结束时，在研究早期进行回归分析。在PTEN-null前列腺模型中，PC3的功效不太明显，25和50mg/kg分别给出59％（P<0.001）和64％（P<0.001）的生长抑制。相反，AZD8186在PTEN缺失的前列腺外植体模型HID28中产生79％（P<0.001）的生长抑制。在小鼠中，AZD8186具有短的半衰期，提供PK曲线，导致在24小时给药间隔内间歇性覆盖。为了增加暴露时间，携带PC3肿瘤的动物在Cyt P450抑制剂ABT存在下与AZD8186共同给药，这导致显着增加的暴露。这也提高了PC3模型的疗效，使用30 mg/kg AZD8186+ABT可使肿瘤生长减少86％（P<0.005）

细胞分析

将细胞以3至0.01μM的浓度暴露于AZD8186，持续2小时。然后用含有25mM Tris/HCL pH6.8,3mM EDTA，3mM EGTA，50mM NaF，2mM原钒酸钠，270mM蔗糖，10mMβ-甘油磷酸盐，5mM焦磷酸钠的缓冲液在冰上裂解细胞。和0.5％Triton X-100以及蛋白酶和磷酸酶抑制剂。用样品上样缓冲液稀释裂解物，在4％至12％Bis-Tris Novex凝胶上分离，转移到硝酸纤维素膜上，并用一抗探测过夜。在洗涤步骤后，将膜与HRP标记的第二抗体一起温育并可视化[1]。

MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考 联系方式：