联系方式：
AZD-7762是一种有效的ATP竞争性的细胞周期检测点激酶(checkpoint kinase，Chk)抑制剂，抑制Chk1，IC50为5 nM

体外

AZD-7762（AZD7762）是体外同样有效的Chk1和Chk2抑制剂。AZD-7762有效抑制Chk1和Chk2，消除DNA损伤诱导的S和G2检查点，增强吉西他滨和拓扑替康的功效，并调节下游检查点途径蛋白。通过闪烁亲近测定法测量，AZD-7762有效抑制cdc25C肽的Chk1磷酸化，IC5​​0为5nM。AZD-7762的Ki确定为3.6 nM。动力学表征表明AZD-7762结合Chk1的ATP结合位点，并且被认为以可逆的方式直接竞争ATP结合。AZD-7762显示消除了喜树碱诱导的G2停滞，平均EC50为10 nM（n=12），消除率为100 nM。

体内

在大鼠H460-DNp53异种移植研究中，AZD-7762（AZD7762）以剂量依赖性方式增强吉西他滨的抗肿瘤活性，随着剂量增加％T/C降低（48％和32％，10和20 mg/kg AZD-7762，分别）。在与伊立替康组合的小鼠异种移植研究中，用载体，单独的伊立替康，单独的AZD-7762或与伊立替康组合的AZD-7762处理SW620建立的肿瘤。单独给药的AZD-7762显示出不显着的抗肿瘤活性，而单独的伊立替康显示出惊人且显着的活性（％T/C随剂量增加分别为9和1）。与AZD-7762组合，％T/C分别显着增加至-66％和-67％[1]。AZD7762与CX-5461的组合在体外和体内诱导Tp53-无效（Tp53-/-）Eμ-Myc淋巴瘤细胞的癌细胞死亡

激酶测定

对于动力学分析，使用过滤器结合测定。测定反应含有以下浓度的ATP[0-600μM（冷+Ci[33P]ATP），测定的Km]，Chk1（0.5nM）和AZD-7762（0,1.5,5,10nM）。将反应物在室温下温育20分钟，通过加入EDTA终止反应，转移至链霉抗生物素蛋白Flashplate，在室温下温育1小时，吸出，并用PBS洗涤孔。使用TopCount读数器计数平板，并使用专有软件分析数据[1]。MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

细胞分析

将AZD-7762（AZD7762）溶解于DMSO中并储存，然后在使用前用适当的培养基（DMSO 0.1％）稀释[1]。

将SW620（每孔5.5×103）或MDA-MB-231（每孔5×103）细胞接种在96孔板中并孵育过夜。将细胞给药24小时，吉西他滨的9点滴定范围为0.01至100nM，有或没有恒定剂量的AZD-7762（300nM）。对照孔用单独的载体（0.1％DMSO）或300nM AZD-7762给药。24小时后，除去培养基，仅将AZD-7762加回到先前用AZD-7762处理的孔中另外24小时。然后将细胞在无药物培养基中再培养72小时。通过MTS测定确定对细胞增殖的影响[1]。MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

Animal Administration

AZD-7762（AZD7762）配制成11.3％羟丙基-β-环糊精（小鼠和大鼠）[1]。

AZD7762（Medchem Express）在0.9％盐水（小鼠）中的10.3％-羟丙基-β-环糊精制备[2]。

小鼠和大鼠[1]

使用雄性NCr小鼠和雄性rnu大鼠。对于小鼠中的异种移植模型，收获肿瘤细胞，通过离心5分钟沉淀，并重悬于无菌PBS中。细胞（3×103-6×106）被植入皮下。使用25号针头进入小鼠的右侧腹部，体积为0.1至0.2mL。在给予化合物之前，允许肿瘤生长至100至200mm 3的指定大小。对于大鼠中的异种移植模型，收获细胞，通过离心5分钟沉淀，并重悬于50％无菌PBS和50％基质胶中。在细胞植入前5天，大鼠接受5Gy全身辐射剂量以改善肿瘤生长。将H460-DNp53细胞（1×10 7）在用异氟烷麻醉的情况下，使用25号针头以0.2mL的体积皮下植入大鼠的右侧腹部。在施用AZD-7762之前，允许肿瘤生长至100至200mm 3的指定大小。AZ.-7762（10和20mg/kg）通过静脉内给药。通过尾静脉注射。使用循环时间表，治疗范围为三到五个周期。每个周期包括每3天施用标准药剂（吉西他滨或伊立替康），然后递送AZD-7762。用电子卡尺测量肿瘤体积并计算。

小鼠[2]

向C57Bl/6小鼠静脉内注射PBS中的2×105Eμ-Myc B淋巴瘤细胞，并在注射后8天用药理学抑制剂处理。继续治疗小鼠直至达到伦理终点;驼背姿势，荷叶边毛发，淋巴结肿大，呼吸困难，体重减轻超过起始体重的20％，行动不便或瘫痪。AZN7762在工作日每天以20mg/kg在0.9％盐水中以10.3％-羟丙基-β-环糊精的形式腹膜内递送。MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。 联系方式：