联系方式：
A-1210477是一种有效的，选择性的MCL-1抑制剂，较弱地作用于BCL-2和BCL-XL，Ki值分别为0.45 nM，132 nM和>660 nM

A-1210477的生物活性

体外

A-1210477（10μM）减少了与MCL-1抗体共免疫沉淀的BIM的量，并且在多种癌细胞系（包括乳腺癌细胞系HCC-1806）中引发MCL-1升高。A-1210477抑制MCL-1-NOXA相互作用，IC50约为1μM，而对BCL-2-BIM或BCL-XL-BCL-XS相互作用没有影响。NSCLC细胞系H2110和H23对A-1210477敏感，细胞活力IC50<10μM，证实A-1210477可以杀死MCL-1依赖性细胞系[1]。A-1210477在短暂（4小时）暴露后诱导H929细胞中广泛的浓度依赖性细胞凋亡。A-1210477与MCL-1相互作用，其Kd为约740nM。A-1210477（10μM）以DRP-1依赖性方式诱导广泛的线粒体片段化[2]。A-1210477以剂量依赖性方式上调BRAF突变体CRC细胞和黑素瘤细胞系A375中的MCL-1表达。A-1210477从MCL-1释放BAK，cobimetinib诱导BAX活化所需的BIM[3]。A-1210477（0,5,10和15μM）对细胞活力的影响极小，但对BCL2High NHL细胞系的导致细胞敏感性大大增强

A-1210477的实验参考方法

激酶测定

在4.52mM磷酸二氢钾，15.48mM磷酸氢二钾，1mM EDTA钠，0.05％Pluronic F-68去污剂，50mM中对BCL-2，BCL-XL和MCL-1进行TR-FRET结合亲和力测定。用于BCL-XL的氯化钠和1mM DTT（pH 7.5）。对于MCL-1测定，将GST标记的MCL-1（1nM）与100nM f-Bak，1nM Tb标记的抗GST混合。抗体和化合物在室温（RT）下保持60分钟。使用340/35nm激发滤光片和520/525（f-Bak）和495/510nm（Tb标记的抗GST抗体）发射滤光片在Envision读板仪上测量荧光。MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

细胞分析

将A-1210477溶解在DMSO中。

将贴壁细胞系以每孔50000个细胞接种于96孔板中，并用半对数步骤稀释的化合物处理48小时，从30μM开始并以0.001μM结束。将多发性骨髓瘤细胞系以每孔15,000-20,000个细胞接种并类似地处理。使用来自Promega的CellTiter-Glo试剂根据制造商的说明书测定对增殖和活力的影响。通过浓度响应数据的非线性回归分析确定IC 50值。MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。 联系方式：