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IMD-0354
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IMD-0354的生物活性
体外
IMD-0354抑制HMC-1细胞中的NF-κB活性,导致肥大细胞的生长因子非依赖性增殖的完全抑制。当用IMD-0354处理抑制NF-κB的DNA结合活性时,细胞增殖被完全抑制。将HMC-1细胞与递增浓度的IMD-0354或STI571一起孵育24,48和72小时,并通过染料排除测试和MTT测定确定细胞的数量和活力。IMD-0354以时间和剂量依赖性方式抑制细胞增殖。与STI571相比,即使在较低浓度下,IMD-0354的抑制作用也是显着的[1]。IMD0354抑制TNF-α诱导的NF-κB转录活性,IC 50为1.2±0.3uM
IMD-0354的实验参考方法
体内
每天施用5mg/kg IMD-0354显着抑制植入已建立的MDA-MB-231肿瘤的裸鼠中的肿瘤扩增。在用IMD-0354治疗的小鼠中,肿瘤进展受到抑制[3]。在用30,10,3或0mg/kg处理的大鼠中,房水中的浸润细胞数为53.6±9.8×105,72.5±17.0×105,127.25±32.0×105和132.0±25.0×105细胞/mL。分别为kg IMD-0354。在30,10,3和0mg/d处理的大鼠中,房水的总蛋白质浓度为92.6±3.1mg/mL,101.5±6.8mg/mL,112.6±1.9mg/mL和117.33±1.8mg/mL。分别为kg IMD-0354
细胞分析
将HMC-1细胞(2×10 5个细胞/mL)与各种浓度的IMD-0354(0.1,0.5,1,5和10uM),STI571或吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)一起孵育指定的小时,并且活细胞在每个时间点使用台盼蓝染料排除测试计算数字。将细胞(2×10 5个细胞/mL)在含有10%FCS(对于HMC-1和IC-2细胞)或5%FCS(对于CBhCMC)和含有或不含各种浓度的抗生素的无酚红α-MEM中孵育。IMD-0354(0.1,0.5,1,5和10uM),STI571或PDTC。将IC-2WT细胞和CBhCMC在100ng/mL重组大鼠或重组人SCF的存在下孵育。将100微升细胞悬浮液应用于96孔培养板的每个孔中,并孵育24,48和72小时。在培养结束4小时之前,向每个孔中加入溶解在PBS中的10μL5mg/mL MTT。加入100μL10%SDS的0.01N HCl溶液终止反应。使用ImmunoMini NJ-2300[1]在577nm处测量吸光度。MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。
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IMD-0354是一种选择性IKKβ抑制剂,抑制NF-κB活性。IMD0354抑制TNF-α诱导的NF-κB转录活性,IC 50为1.2±0.3μMIMD-0354的生物活性
体外
IMD-0354抑制HMC-1细胞中的NF-κB活性,导致肥大细胞的生长因子非依赖性增殖的完全抑制。当用IMD-0354处理抑制NF-κB的DNA结合活性时,细胞增殖被完全抑制。将HMC-1细胞与递增浓度的IMD-0354或STI571一起孵育24,48和72小时,并通过染料排除测试和MTT测定确定细胞的数量和活力。IMD-0354以时间和剂量依赖性方式抑制细胞增殖。与STI571相比,即使在较低浓度下,IMD-0354的抑制作用也是显着的[1]。IMD0354抑制TNF-α诱导的NF-κB转录活性,IC 50为1.2±0.3uM
IMD-0354的实验参考方法
体内
每天施用5mg/kg IMD-0354显着抑制植入已建立的MDA-MB-231肿瘤的裸鼠中的肿瘤扩增。在用IMD-0354治疗的小鼠中,肿瘤进展受到抑制[3]。在用30,10,3或0mg/kg处理的大鼠中,房水中的浸润细胞数为53.6±9.8×105,72.5±17.0×105,127.25±32.0×105和132.0±25.0×105细胞/mL。分别为kg IMD-0354。在30,10,3和0mg/d处理的大鼠中,房水的总蛋白质浓度为92.6±3.1mg/mL,101.5±6.8mg/mL,112.6±1.9mg/mL和117.33±1.8mg/mL。分别为kg IMD-0354
细胞分析
将HMC-1细胞(2×10 5个细胞/mL)与各种浓度的IMD-0354(0.1,0.5,1,5和10uM),STI571或吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)一起孵育指定的小时,并且活细胞在每个时间点使用台盼蓝染料排除测试计算数字。将细胞(2×10 5个细胞/mL)在含有10%FCS(对于HMC-1和IC-2细胞)或5%FCS(对于CBhCMC)和含有或不含各种浓度的抗生素的无酚红α-MEM中孵育。IMD-0354(0.1,0.5,1,5和10uM),STI571或PDTC。将IC-2WT细胞和CBhCMC在100ng/mL重组大鼠或重组人SCF的存在下孵育。将100微升细胞悬浮液应用于96孔培养板的每个孔中,并孵育24,48和72小时。在培养结束4小时之前,向每个孔中加入溶解在PBS中的10μL5mg/mL MTT。加入100μL10%SDS的0.01N HCl溶液终止反应。使用ImmunoMini NJ-2300[1]在577nm处测量吸光度。MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。
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