联系方式：
Nocodazole是一种快速可逆的microtubule聚合抑制剂，也能够有效抑制ABL，ABL(E255K)和ABL(T315I)的活性，IC50值分别为0.21μM，0.53μM和0.64μM；同时可以增强CRISPR/Cas9的活性

Nocodazole的生物活性

体外

诺考达唑对c-KIT表现出良好的亲和力，在高度恶性的人癌细胞中Kd值为1.6μM。诺考达唑对促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）途径的组分显示出良好的结合亲和力，例如BRAF（Kd=1.8μM），BRAF（V600E）（Kd=1.1μM），MEK1（Kd=1.7μM），和MEK2（Kd=1.6μM）[1]。诺考达唑对αβIV的亲和力，对αβIII的亲和力[2]。在从诺考达唑阻断剂释放后，在有丝分裂中同步的细胞对非常低浓度的紫杉醇敏感，对于<1。30分钟，纺锤体形成所需的时间，但仍然对长春碱保持敏感>90分钟[3]。Nocodazole（1 nM）诱导COLO 205癌细胞凋亡[4]。Nocodazole（≥30μg/mL）显着增加膜联蛋白-V结合细胞的百分比，而不显着改变人红细胞的平均前向散射[5]。

体内

Nocodazole（5mg/kg/每周三次，腹膜内注射）在携带COLO 205肿瘤异种移植物的无胸腺小鼠中具有抗肿瘤作用。Nocodazole（1 nM）+酮康唑显着增加肿瘤组织中p21/CIP1和p27/KIP1蛋白的水平

Nocodazole的实验参考方法

细胞分析

[4]

将Nocodazole溶解在0.05％DMSO的终浓度。

蛋白质以50μg/泳道加载，并用12％（w：v）十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，印迹，并用抗体对细胞周期蛋白E，p53，p21/CIP1，p27/KIP1，甘油醛-3-磷酸进行探测。脱氢酶（GAPDH），细胞周期蛋白A，细胞周期蛋白D1，细胞周期蛋白D3，细胞周期蛋白B，CDK2，CDK4和细胞色素C.免疫反应条带通过与发色底物氮蓝四唑和5-溴-4-氯-3-吲哚-一起孵育而可视化。磷酸盐。GAPDH的表达用作相等蛋白质加载的对照。MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

Animal Administration

将诺考达唑溶解在DMSO中。

COLO 205细胞在补充有10％FCS的RPMI 1640中生长。通过连续两次胰蛋白酶消化收获细胞，以300×g离心;保持5分钟，洗涤两次，并重悬于无菌磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。将0.1mL的细胞（5×105）皮下注射到每只裸鼠的肩胛骨之间。移植后，用卡尺测量肿瘤大小，估计肿瘤体积。一旦肿瘤达到平均大小200 mm3，动物每周三次腹膜内注射DMSO（25μL），酮康唑（50 mg/kg），诺考达唑（5 mg/kg）或酮康唑+诺考达唑，持续6周。MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。 联系方式：