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技术文章
仁捷生物人(KLK10)ELISA试剂盒检测范围及原理
点击次数:188 发布时间:2019/2/19 13:26:51
人激肽释放酶10(KLK10)elisa试剂盒
实验类型:夹心法
检测范围:0.25 ng/mL – 8 ng/mL
检测限:0.1 ng/mL
应用范围:血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体(本产品仅供实验室科研及非临床用途)
实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人激肽释放酶10(KLK10)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的人激肽释放酶10(KLK10)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
人激肽释放酶10(KLK10)ELISA试剂盒组成
试剂盒组成 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
---|---|---|---|
微孔酶标板 | 8孔×12条 | 8孔×6条 | 无 |
标准品 | 0.3mL×6管 | 0.3mL×6管 | 无 |
样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 无 |
底物B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
备注:
1. 标准品浓度依次为:8、4、2、1、0.5、0 ng/mL
2. 经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。
样本处理及要求
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响*后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
试剂准备
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
试剂盒性能
1. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
2. 重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。
注释:本公司所有产品仅用于科研,不得用于临床。
原创作者:上海仁捷生物科技有限公司