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技术文章
小鼠胎球蛋白AELISA检测试剂盒(双抗夹心法)
点击次数:178 发布时间:2019/3/19 10:47:26
小鼠胎球蛋白AELISA检测试剂盒(双抗夹心法)实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠胎球蛋白A(fetuin-A)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠胎球蛋白A(fetuin-A)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
小鼠胎球蛋白A(Fetuin-A)ELISA检测试剂盒
实验类型:夹心法
检测范围:62.5 ng/ml - 2000 ng/ml
检测限:10 ng/ml
应用范围:血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体(本产品仅供实验室科研及非临床用途)
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
原创作者:上海仁捷生物科技有限公司