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技术文章
双缩脲法蛋白含量测试盒实验科研
点击次数：260 发布时间：2021/4/8 19:51:47
测定意义：样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
测定原理：强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物；紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。该方法测定范围为1~10mg蛋白质，适用于蛋白质浓度高的样品，尤其是动物材料。
自备仪器和用品: 可见分光光度计、移液器、微量玻璃比色皿/96孔板和蒸馏水。
注意：实验之建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
样本处理
1、液体样本：澄清无色液体样本可以直接测定。
2、组织样本：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提 取液）冰浴匀浆，10000rpm，4℃离心 10min，取上清，即待测液。（动物样本常常需要稀释）
3、细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 ，间隔 7 ，总时间 3min）；然后 8000g，4℃，离心 10min， 取上清置于冰上待测。
测定原理：强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物；紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。该方法测定范围为1~10mg蛋白质，适用于蛋白质浓度高的样品，尤其是动物材料。
自备仪器和用品: 可见分光光度计、移液器、微量玻璃比色皿/96孔板和蒸馏水。
注意：实验之建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
样本处理
1、液体样本：澄清无色液体样本可以直接测定。
2、组织样本：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提 取液）冰浴匀浆，10000rpm，4℃离心 10min，取上清，即待测液。（动物样本常常需要稀释）
3、细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 ，间隔 7 ，总时间 3min）；然后 8000g，4℃，离心 10min， 取上清置于冰上待测。
原创作者：山东华网智能科技股份有限公司
