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乙醇脱氢酶（ADH）测试盒实验科研
点击次数：288 发布时间：2021/5/10 21:57:07
乙醇脱氢酶（ADH）测试盒实验科研
测定意义：ADH是生物体内短链醇代谢的关键酶，催化乙醇与乙醛可逆转换，在很多生理过程中起着重要作用。哺乳动物ADH主要在肝脏生成，肝脏损伤导致ADH释放到血清中。血清ADH活性高低反映了肝功能是否异常。
测定原理：ADH催化NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+，NADH在340nm处有吸收峰，而NAD+没有；测定340nm 吸光度下降速率，来计算ADH活性。
需要的仪器，耗材:研钵、冰、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液器和蒸馏水。
注意：实验之建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
乙醇脱氢酶（ADH）测试盒实验科研
样本处理
1、 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取 液）进行冰浴匀浆。16000g，4℃离心 20min，取上清置冰上待测。
2、 细菌、细胞：按照细胞数量（10 4个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 ，间隔 7 ，总时间 3min）；16000g，4℃离心 20min， 取上清液置冰上待测。
3、血清等液体：直接测定。
测定意义：ADH是生物体内短链醇代谢的关键酶，催化乙醇与乙醛可逆转换，在很多生理过程中起着重要作用。哺乳动物ADH主要在肝脏生成，肝脏损伤导致ADH释放到血清中。血清ADH活性高低反映了肝功能是否异常。
测定原理：ADH催化NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+，NADH在340nm处有吸收峰，而NAD+没有；测定340nm 吸光度下降速率，来计算ADH活性。
需要的仪器，耗材:研钵、冰、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液器和蒸馏水。
注意：实验之建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
乙醇脱氢酶（ADH）测试盒实验科研
样本处理
1、 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取 液）进行冰浴匀浆。16000g，4℃离心 20min，取上清置冰上待测。
2、 细菌、细胞：按照细胞数量（10 4个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 ，间隔 7 ，总时间 3min）；16000g，4℃离心 20min， 取上清液置冰上待测。
3、血清等液体：直接测定。
原创作者：山东华网智能科技股份有限公司
