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牛血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒定量分析
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详细内容
牛血管活性肠肽(VIP)elisa试剂盒定量分析仅供科研实验
贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
有效期:6个月
用途:本产品仅供科学研究
规格:48T/96T(可提供免费代测服务)
1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2.灵敏度:检测浓度小于10 pg/ml。
3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。问题回答
牛血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒定量分析组成:
1、酶联板(assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(sample diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(biotin-antibody diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (hrp-avidin diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(hrp-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(tmb substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(wash buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(stop solution):1×10ml/瓶(2n h2so4)。
牛血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒定量分析
问:新鲜采集后直接零下20度冻存的可以呗,放在95%的酒精里保存的样品可以吗?
答:可以的
问:我们算出来的ACH含量为什么出现负值?
答:说明个别样本的浓度很低,当浓度接近第6个点的时候 直线方程就有可能计算出负值
问:一个孔需要多少量的血清?
答:一个孔上样量微升。
问:那标准品出现跳孔是怎么回事?
答:你完全可以拿同样的标准品再重新做一次 ,做之前摇匀一下,肯定可以做好 。那是操作问题了 ,你可以再做一次的,之前也有客户出现过类似的问题 学生做了2次都没做好 后来老师自己做 就是摇匀了一下,其他操作都一样 标准曲线做的很完美。
牛血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒定量分析实验操作时需注意事项:
1.标准品的稀释与加样
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30(48t的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48t的20倍)倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂a50μl,再加入显色剂b50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(od值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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