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技术文章
小鼠免疫球蛋白GELISA检测试剂盒操作步骤
点击次数：58 发布时间：2021/9/1 14:09:20
小鼠免疫球蛋白GELISA检测试剂盒操作步骤
1、血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。
5、保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
1.不同厂家生产的试剂盒因生产工艺和操作方法略有不同，务必按照所用试剂盒严格操作，否则容易产生检测结果的不确定性.
2.若不同批号人ELISA试剂盒的不同组分(A液或酶工作液)，或不同试剂的不同组分进行交叉使用，有可能出现显色浅或本底高，花板等情形。
3.反应时间的误差，做大量标本时，Di一孔和后一孔以及一些特殊标本可能影响较大。
4.临界值附近标本波动为正常现象，任何试剂均不可避免。可以考虑将标本做奇数次复检。
小鼠免疫球蛋白GELISA检测试剂盒操作步骤
准备试剂，样品和标准品
准备试剂，样品和标准品
加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟
洗板4次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟
洗板4次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟
加入终止液
15分钟之内读OD值
原创作者：上海仁捷生物科技有限公司
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