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如何正确保存豚鼠血清
点击次数:536 发布时间:2017/12/11 16:04:43
如何正确保存豚鼠血清?保存豚鼠血清的注意事项!
在说到这个问题前,我们很有必要先认识一下什么是动物血清?
一,动物血清简介:
动物血清是指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞的起到某些保护作用。
对于科研人员来说,会经常使用到各种动物的血清血浆,比如*常见的血清有:马血清 、兔血清 、鸡血清 、猪血清 、马血清 、 狗血清、兔血清、山羊血清、特级新生牛血清、优级新生牛血清绵羊血清、大鼠血清、小鼠血清、人血清、虽然动物血清的种属很多,但在市场上对于如何选购正品动物血清也是一件比较头痛的事!
今天由我们先详细讲述一下如何正确保存豚鼠血清!
二,保存豚鼠血清方法:
1.将豚鼠血清应冷藏或冷冻保存。
2.采集样品后,如果能在短时间内送达实验室,则可以放在4°C左右的容器中运送;需长期保存的,将血清臵于-20°C冷冻。
3.2-8°C条件下,血清可保存15d;-15°C以下可保存2年。
4.解冻 血清不宜反复冻融。
5.反复冻融会使血清中的脂蛋白和纤维蛋白变性,导致出现絮状沉淀物(影响血清抗体效价)。
6.拭子样品应保存在PBS液中,冷冻保存。
三,保存豚鼠血清注意事项:
2.热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。
3.瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。
4.一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。
5.血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理. 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。
6.切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量。
在说到这个问题前,我们很有必要先认识一下什么是动物血清?
一,动物血清简介:
动物血清是指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞的起到某些保护作用。
对于科研人员来说,会经常使用到各种动物的血清血浆,比如*常见的血清有:马血清 、兔血清 、鸡血清 、猪血清 、马血清 、 狗血清、兔血清、山羊血清、特级新生牛血清、优级新生牛血清绵羊血清、大鼠血清、小鼠血清、人血清、虽然动物血清的种属很多,但在市场上对于如何选购正品动物血清也是一件比较头痛的事!
今天由我们先详细讲述一下如何正确保存豚鼠血清!
二,保存豚鼠血清方法:
1.将豚鼠血清应冷藏或冷冻保存。
2.采集样品后,如果能在短时间内送达实验室,则可以放在4°C左右的容器中运送;需长期保存的,将血清臵于-20°C冷冻。
3.2-8°C条件下,血清可保存15d;-15°C以下可保存2年。
4.解冻 血清不宜反复冻融。
5.反复冻融会使血清中的脂蛋白和纤维蛋白变性,导致出现絮状沉淀物(影响血清抗体效价)。
6.拭子样品应保存在PBS液中,冷冻保存。
三,保存豚鼠血清注意事项:
1.需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。
2.热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。
3.瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。
4.一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。
5.血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理. 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。
6.切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量。
原创作者:上海远慕生物科技有限公司