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怎么知道您的细胞正遭受支原体摧残呢
点击次数：426 发布时间：2019/8/22 10:39:57
培养细胞时，
发现细胞增殖变慢、
形态渐渐改变，
是血清或培养基的问题吗？
很有可能是你的细胞污染了~~~~~
支原体污染
细胞污染可分为细菌、霉菌、酵母菌、支原体污染，其中支原体污染发生的概率>50%。支原体(Mycoplasma) 是*小的原核生物，约0.1-0.3μm，可穿透0.22-0.45 μm 过滤膜 （BI血清经过3次0.1μm滤膜并且检测支原体)。
支原体污染棘手的原因是没有如其他污染源“立即可辨”的现象，支原体污染侵袭细胞但是并不一定致死。如果您的细胞出现如下状态：增殖变慢、形态变差、培养液变黄但是没有浑浊，说明您的细胞可能正遭受支原体的摧残！！
受支原体污染的293T 正常无污染的293T
支原体检测
怎么知道您的细胞正遭受支原体摧残呢，常见的检测方法几种：
1.分离培养法
将可疑样本接种到支原体培养基中，观察菌落生成。缺点:培养时间长，须3~5周才能判断。
2.DNA荧光染色法
利用荧光染剂 (Bisbenzimide, Hoechst 33258) 检测支原体污染，但若有些细胞易有荧光背景，可能会干扰结果判读。
3.PCR法
利用特异性引物，经PCR反应检测支原体DNA，灵敏且快速。
BI EZ-PCR支原体检测试剂盒：采用PCR法，简化了细胞培养中支原体污染的检测过程，可检测出细胞培养实验中常见的支原体污染。
试剂盒中包含独特的反应混合液，以及PCR中需要的所有试剂。使用者只需备有样品，*后产物跑完胶后，如有一个270bp的片段，则代表有支原体污染，整个检测过程耗时约4小时。
怎么知道您的细胞正遭受支原体摧残呢，常见的检测方法几种：
1.分离培养法
将可疑样本接种到支原体培养基中，观察菌落生成。缺点:培养时间长，须3~5周才能判断。
2.DNA荧光染色法
利用荧光染剂 (Bisbenzimide, Hoechst 33258) 检测支原体污染，但若有些细胞易有荧光背景，可能会干扰结果判读。
3.PCR法
利用特异性引物，经PCR反应检测支原体DNA，灵敏且快速。
BI EZ-PCR支原体检测试剂盒：采用PCR法，简化了细胞培养中支原体污染的检测过程，可检测出细胞培养实验中常见的支原体污染。
试剂盒中包含独特的反应混合液，以及PCR中需要的所有试剂。使用者只需备有样品，*后产物跑完胶后，如有一个270bp的片段，则代表有支原体污染，整个检测过程耗时约4小时。
原创作者：上海远慕生物科技有限公司
