小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)elisa试剂盒仅用科研技术支持

贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
有效期：6个月
用途：本产品仅供科学研究
规格：48T/96T（可提供免费代测服务）
1．准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2．灵敏度：检测浓度小于10 pg/ml。
3．特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4．重复性：板内、板间变异系数均小于15%。问题回答

小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)ELISA试剂盒仅用科研组成:

1、酶联板（assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（sample diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（biotin-antibody diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （hrp-avidin diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（hrp-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（tmb substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（wash buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（stop solution）：1×10ml/瓶（2n h2so4）。

小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)ELISA试剂盒仅用科研

问：新鲜采集后直接零下20度冻存的可以呗，放在95%的酒精里保存的样品可以吗？
答:可以的
问：我们算出来的ACH含量为什么出现负值?
答：说明个别样本的浓度很低，当浓度接近第6个点的时候 直线方程就有可能计算出负值
问：一个孔需要多少量的血清?
答：一个孔上样量微升。
问：那标准品出现跳孔是怎么回事?
答：你完全可以拿同样的标准品再重新做一次 ，做之前摇匀一下，肯定可以做好 。那是操作问题了 ，你可以再做一次的，之前也有客户出现过类似的问题 学生做了2次都没做好 后来老师自己做 就是摇匀了一下，其他操作都一样 标准曲线做的很完美。

 

小鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)ELISA试剂盒仅用科研实验操作时需注意事项：

1.标准品的稀释与加样
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品*终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30（48t的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48t的20倍）倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂a50μl，再加入显色剂b50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（od值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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