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人性激素结合球蛋白ELISA 检测试剂盒
本试剂仅供研究使用 标本:血清或血浆
试验原理:
SHBG试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知SHBG浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将SHBG和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中SHBG的浓度呈比例关系。
安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
人性激素结合球蛋白ELISA 检测试剂盒
操作注意事项
试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人性激素结合球蛋白ELISA 检测试剂盒
操作步骤
使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。
试剂盒性能
1. 灵敏度:*小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
人性激素结合球蛋白ELISA 检测试剂盒
结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的SHBG标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的SHBG含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-800pg/ml
4、敏感度: 1.0 pg/ml
IL-23R(Interleukin-23 receptor) 白介素-23受体抗体 0.2ml
IL-19/NG.1(Interleukin-19) 白细胞介素-19抗体 0.2ml
IL-20Rα/IL20RA(Interleukin-20 receptor alpha chain precursor) 白介素20受体α链抗体 0.2ml
IL-20RB/IL-20R2(Interleukin-20 receptor subunit beta) 白介素20受体β链抗体 0.2ml
Goat anti-Guinea pig IgG/Gold 金标记羊抗豚鼠IgG (10nm/15nm) 1ml
Goat anti-rabbit IgG/Glod 金标记羊抗兔IgG(10nm/15nm) 0.5ml
Goat anti-rabbit IgG/Glod 金标记羊抗兔IgG(10nm/15nm) 1ml
IL-21(Interleukin-21) 白介素21抗体 0.2ml
IL-21R(Interleukin-21 receptor) 白介素21受体抗体 0.2ml
IL-22/ZCYTO18(Interleukin-22) 白介素-22抗体 0.2ml
IL-22R/IL22RA1 (Interleukin-22 receptor subunit alpha-1) 白介素-22受体抗体 0.2ml
IL-22BP/IL22RA2(Interleukin-22 receptor subunit alpha-2) 白介素22受体结合蛋白抗体 0.2ml
IL1RAPL1 (Interleukin 1 receptor accessory protein-like 1) 白介素受体相关蛋白样1前体蛋白抗体 0.2ml
IL-26/AK155(Interleukin-26/Protein AK155 ) 白介素26抗体 0.2ml
Mouse anti-Goat IgM/Gold 金标记鼠抗羊IgM(10nm/15nm) 2ml
Mouse anti-human IgG/Gold 金标记小鼠抗人IgG (10nm/15nm) 2ml
Mouse anti-human IgM/Gold 金标记小鼠抗人IgM (10nm/15nm) 2ml
IL-28A/IFNL2(Interleukin 28/Interferon lambda-2) 白细胞介素28A抗体 0.2ml
IL-28B/IL-28C/IFNL3/IFNL4(Interleukin-28B) 白细胞介素28B抗体 0.2ml
IL-29/IFNL1(Interleukin-29/Interferon lambda-1) 白细胞介素29抗体 0.2ml
IL-31(Interleukin-31) 白细胞介素31抗体 0.2ml
IL-31RA/CRL3(Interleukin-31 receptor subunit alpha) 白介素31受体a抗体 0.2ml
IL-32/NK4(Interleukin-32/Natural killer cells protein 4) 白介素32抗体 0.2ml
IRAK 2(IL-1 Receptor-associated Kinase 2) 白介素-1受体相关激酶2抗体 0.1ml
IRAK 2(IL-1 Receptor-associated Kinase 2) 白介素-1受体相关激酶2抗体 0.2ml
Mouse anti-rabbit IgG/Gold 金标记小鼠抗兔IgG (10nm/15nm) 2ml
IL-33/NFHEV(Interleukin-33/Nuclear factor from high endothelial venules) 白介素33抗体 0.2ml
IL-1α (Interleukin-1α ) 白介素1α抗体 0.1ml
IL-1α (Interleukin-1α ) 白介素1α抗体 0.2ml
IL-1β/IL-1B(Interleukin-1β) 白介素1β抗体 0.1ml
IL-1β/IL-1B(Interleukin-1β) 白介素1β抗体 0.2ml
IL-2 (Interleukin-2)to mouse,rat 白介素2抗体(大、小鼠) 0.1ml
IL-2 (Interleukin-2)to mouse,rat 白介素2抗体(大、小鼠) 0.2ml
Mose rat IgG/Gold 金标记小鼠抗大鼠IgG (10nm/15nm) 2ml
Mose rat IgM/Gold 金标记小鼠抗大鼠IgM(10nm/15nm) 2ml
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