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96T豚鼠白细胞介素-17ELISA 检测试剂盒

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上传时间:2012/8/10 12:02:07

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上 传 者:上海信然生物技术有限公司

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豚鼠白细胞介素-17ELISA 检测试剂盒

本试剂仅供研究使用      标本:血清或血浆

试验原理:
IL-17试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IL-17浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将IL-17和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IL-17的浓度呈比例关系。
自备材料
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。

豚鼠白细胞介素-17ELISA 检测试剂盒

安全性
1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作注意事项
1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

豚鼠白细胞介素-17ELISA 检测试剂盒

样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。


操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。

6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。

豚鼠白细胞介素-17ELISA 检测试剂盒

试剂盒性能
1. 灵敏度:*小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的IL-17标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的IL-17含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、检测值范围:0-800pg/ml

4、敏感度: 1.0 pg/ml
Linoleic acid 亚油酸 [60-33-3] 10g
γ- Linolenic acid γ-亚麻酸 [506-26-3] 1g
(±)-α-Lipoic acid 硫辛酸 [1077-28-7] 100g
Lithium acetate dihydrate 乙酸锂二水 [6108-17-4] 250g
Lithium benzoate 苯甲酸锂 [553-54-8] 100g
Lithium bromide 无水溴化锂 [7550-35-8] 100g
Lithium carbonate 碳酸锂 [554-13-2] 250g
Lithium chloride 氯化锂 [7447-41-8] 250g
Lithium lactate DL-乳酸锂 [16891-53-5] 50g
Lithium lactate DL-乳酸锂 [16891-53-5] 50g
Lithium chloride 氯化锂 [7447-41-8] 25g
Lithium chloride 氯化锂 [7447-41-8] 100g
Lithium chloride 氯化锂 [7447-41-8] 500g
Lithium chloride 氯化锂 [7447-41-8] 250g
Lithium citrate, tetrahydrate 柠檬酸锂四水 [6080-58-6] 250g
Lithium 3,5-diiodosalicylate 3,5-二碘水杨酸锂 [653-14-5] 5g
Lithium dodecyl sulfate 十二烷基硫酸锂 [2044-56-6] 25g
Lithium dodecyl sulfate 十二烷基硫酸锂 [2044-56-6] 100g
Lithium dodecyl sulfate 十二烷基硫酸锂 [2044-56-6] 25g
Lithium fluoride 氟化锂 [7789-24-4] 100g
Lithium hydroxide, monohydrate 氢氧化锂一水 [1310-66-3] 250g
Lithium hydroxide, monohydrate 氢氧化锂一水 [1310-66-3] 250g
Lithium lactate DL-乳酸锂 [16891-53-5] 250g

 

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