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| 人细胞间粘附分子1（ICAM-1/CD54）ELISA KIT |
1仔细阅读说明书
2确定试剂盒在期内
3按说明书确定所有试剂齐全（数量、体积）
4标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备（贮存），尽量分装做备份。短期内无法实验者，注意低温保存
5准备好所有实验额外所需物品，如试管、吸头、移液器、离心机等
6根据检测标本数量确定所需试剂的量
7按说明书将所用试剂平衡至室温，配制所需试剂
DIY夹心法ELISA常见技术指南
8选择抗体时选择一个单抗和一个多抗进行配对；若选择两个单抗，必须识别不同表位的抗体；从同一家公司选择抗体对。
9ELISA实验中为了确定信号和背景应将捕获抗体（0.5-4μg/ml）和检测抗体（0.25-2μg/ml）在预实验中进行彼此相抗的滴定。同时，应包括在适当范围内的标准品的系列稀释。按试剂说明书常规提供的范围进行操作。
10标准品的配制：对于每种细胞因子应仔细阅读说明书，注意每批的细节。在使用细胞因子前，瞬时离心试剂瓶，尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节，将冻干的细胞因子复溶。
11一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。
12为了优化灵敏度，建议过夜孵育标准品和标本。
13若使用过氧化物酶作为显色系统，应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠，叠氮钠可抑制过氧化物酶的活性。
14当测定混合液体中的抗原时，如血清，建议在标本稀释液中加不相干的Ig.
注意事项
1.此试剂为体外检测试剂，效期内使用，试剂应视为传染物，不同总批号的试剂不能混用。
2.使用前应将盒内各试剂取出，室温放置至少30分钟。
3.保存于2-8℃，请勿冷冻，期请见盒内标示。
4.浓缩洗涤液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟
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