产品名称：尼考胺ELISA试剂盒
货号：ZK-132

规格：96T
方法：ELISA方法
样本类型：各种动物肌肉组织、尿液、血清、水产、饲料等

储存：原包装应储存于2～8℃保鲜冷藏，切勿冷冻。

有效期：有效期12个月;生产日期、有效期、生产批号见外包装。

尼考胺ELISA试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在微孔条上预包被尼考胺偶联抗原，样本中的残留物尼考胺和微孔条上预包被的尼考胺偶联抗原竞争尼考胺抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光值与其所含残留物尼考胺的含量成负相关，与标准曲线比较可得出相应残留物尼考胺的含量。

操作步骤

1、从4℃冷藏环境中取出所需试剂，置室 温（20-25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用均须摇匀。

2、取出框架及需要数量的微孔，将不用的微孔放入自封袋，保存于2-8℃。

3、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

4、加标准品或样本50μl/孔到各自的微孔中，然后加抗体50μl/孔，用盖板膜封板，轻轻振荡混匀。25℃环境中反应30min。

5、取出酶标板，将孔内液体甩干，用洗液250μl /孔，洗板4－5次，每次间隔15-30s，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破）。

6、每孔加入酶标记物100μl，盖板膜盖板后置25℃环境中反应30min。

7、取出酶标板，将孔内液体甩干，用洗液250μl /孔，洗板4－5次，每次间隔15-30s，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破）。

8、显色：每孔加入底物液A液50μl， 再加B液50μl，轻轻振荡混匀，25℃环境中避光显色15min。

9、测定：每孔加入终止液50μl，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630nm检测，在5min内读完数据），测定每孔OD值。

尼考胺ELISA试剂盒结果判定   
结果判定有两种方法，粗略判定可用第1种方法，定量判定用第2种方法。注意样本吸光值与其所含尼考胺成负相关。

注意事项  

1、使用将所有试剂温度回升至室温20-25℃。试剂及标本没有回到室温（20-25℃）会导致所有标准的OD值偏低。

2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会伴随着出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。

3、混合要均匀，否则会出现重复性不好的现象。

4、反应终止液为2M硫suan，避免接触皮肤。

5、不要使用过了有效日期的试剂盒，稀释或搀杂使用会引起灵敏度、OD值的变化。不要交换使用不同批号的盒中试剂。

6、不用的微孔板放进自封袋密封；标准物质和无色的发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。

7、显色液若有任何颜色表明变质，应当弃之。0标准的吸光度值小于0.5个单位（A_450nm< 0.5 ）时，表示试剂可能变质。

8、该试剂盒反应温度为25℃，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。