一、人可溶程序性死亡因子(sPD-1)elisa试剂盒说明书实验原理

9月25日消息，上海臻科报道：人可溶程序性死亡因子(sPD-1)ELISA试剂盒说明书是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人可溶程序性死亡因子(sPD-1)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的人可溶程序性死亡因子(sPD-1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

二、人可溶程序性死亡因子(sPD-1)ELISA试剂盒说明书产品优势

1、优势明显  众所周知产品具有灵敏度高、特异性强的特点决定的产品好坏，我司产品具有稳定的重复性，吸附性能好,空白值低，并适用于血清血浆 组织匀浆等多种样本类型的检测，方法简单，操作方便，限度的节省了实验经费。

2、品质保障  产品保证质量，出库质检把控严格，保障提供给客户的100%是优质产品，运输全程跟踪，公司承诺有任何质量问题包退换，诚信经营，合作共赢。我们提供实验室试剂、耗材一站式供应服务，超低价，高品质，进口品牌全线代理，优势的渠道，我们只做行货，不用担心质量问题。售后技术支持到底！

3、专业定制  应市场需求公司特推出专业定制酶联免疫分析试剂盒服务，全程有专业的技术老师跟踪并和客户保持沟通，直到定制成功为止。

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三、人可溶程序性死亡因子(sPD-1)ELISA试剂盒标本要求

1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

四、人可溶程序性死亡因子(sPD-1)ELISA试剂盒操作流程

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

五、人可溶程序性死亡因子(sPD-1)ELISA检测试剂盒注意事项

1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

2.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

3.请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请*后乘以总稀释倍数（×n×5）。

4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

5.底物请避光保存。

6.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

7.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

8.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。试剂盒2-8℃保存，有效期6个月

。本试剂盒仅供科研使用，不得用于临床诊断

六、订购流程

首先联系我司客服专员，确定指标名称、规格、数量签订购销合同，做合同需提供单位信息和收货地址，其次按照合同账号打款，安排发货发票随货，*后收到货请仔细检查外包装是否有破损，另外我司有完善的售后服务，如遇任何问题可先联系客服处理，当天都会有答复。

七、人可溶程序性死亡因子(sPD-1)ELISA试剂盒标准曲线绘制

以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。

八、特别说明

上海臻科长期专业供应各类科研产品，包括ELISA试剂盒、生物试剂、培养基、检测卡、染色液染色试剂盒等优质产品。公司本着客户至上的原则为客户提供高质量高品质的产品，公司承诺如有任何质量的问题请打电话与我司工作人员联系,免费包退换（非人为因素造成的）。以上是上海臻科生物科技有限公司的产品介绍，如需了解更多可联系我司客服专员。