一、 仪器与试剂

1. 仪器:UV2101  PC紫外-可见分光光度计

2. 试剂:甲醇、氯化钴、改良对二甲氨基甲醛(取对二甲氨基甲醛1g，加盐酸34Ml, 甲醇100mL,混匀，即得)

二、 溶液制备

1. 样品溶液制备  精密称取提取物样品约120mg(60%总皂甙),原料样品2000~1600mg,置50mL容量瓶中，加甲醇约20mL, 超声波振荡(提取物20min,原料1h),冷却至室温，用甲醇稀释至刻度，过滤，精密吸取溶液5mL,置具塞试管中,改良对二甲氨基甲醛溶液5mL,密塞，摇匀。置58±2℃水浴中加热2h,即得样品溶液。

2. 样品用空白溶液制备   以甲醇代替样品溶液，同法处理即得空白溶液。

3. 标准品溶液制备      精密称取氯化钴试剂约0.6g，置25mL量瓶中，加水使溶解，用水定容，摇匀即得标准品溶液。

4. 标准品用空白溶液制备   以水为空白溶液。

三．样品处理

1 主要针对称样量，溶解试剂量，超声时间。取3个平行样品，称样量依次为120mg(60%总皂甙),180mg(60%总皂甙), 240mg(60%总皂甙)，置50ml容量瓶中，依次加甲醇为20ml,25ml,30ml,超声波震荡依次为20min,25min,30min,冷却至室温（目的是为了避免个人误差和系统误差）

2 水溶加热时的注意事项和处理方法：在人工加热过程中，使水温保持在56-60度之间。每隔10分钟左右用温度计进行测量，若水温超出正常范围，应及时加水，使水温保持在正常范围内。

四．样品测定

打开仪器电源，预热20min，待仪器自检通过后，在515nm处分别以水和样品空白溶液作为空白，测定标准品溶液产样品溶液吸收度。

五. 结果计算

C%=

式中:A、W分别代表样品吸收什和称样量(mg)

As、Ws分别代表标准品吸收值和称样量(mg)

注意：

1.样品不允许用水浸润后加甲醇溶解

2.样品不允许用含水甲醇溶解

3.原料样3~4g/100mL.

4.在水溶加热过程中，应塞紧试管瓶口，避免让水蒸汽或水接触溶液

5.显色反映：水溶加热2H后的溶液，迅速使溶液温度降至室温，正常情况需啊显色后颜色为淡红色。3个平行样品的颜色依次加深。