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技术文章
细胞免疫染色复染
点击次数：598 发布时间：2011/3/24 18:16:08
复染常有助于在细胞免疫染色中鉴别不同的细胞类型，或者亚细胞结构。这对组织切片来说是基本步骤，并可鉴定细胞的类型。也可用于其他染色反应。复染不能使用荧光染料，因其复染后可产生自发荧光。为了选择一种适宜的复染方法，首先应检测细胞染色试剂是否在乙醇中可溶。
1．不溶于乙醇的方法
（1）用水轻轻洗涤标本片；
（2）加数滴Harris苏木精（商品化试剂）于标本中，孵育约5min。染色时间的长短决定染色的强度；
（3）用水轻轻洗涤；
（4）用0．5％冰乙酸／99．5％乙醇处理标本片大约10rain；
（5）用水轻轻洗涤；
（6）用DPX封片。
2．溶于乙醇的方法
（1）用水轻轻洗涤标本片；
（2）加数滴Mayer苏木精（商品化试剂）至标本片，孵育大约5min，染色时间的长短决定染色的强度；
（3）用水轻轻洗涤；
（4）用30mm01／L氢氧化铵重复处理标本片
（5）用水轻轻洗涤；
（6）用Gelvat01或MOWi。1封片。
| 复染 | 推荐用法 | 需准备试齐 | 优 点 | 缺 点 |
| 苏木精 | 可用于黑色或棕色染料；用于核或细胞质抗原染色 | 可购买 | 可保存的信息量大；核大 | 染色很暗，不适合弱抗原信号的显示 |
| 甲基绿 | 可用黑色或棕色染色，用于核抗原染色 | 贮存液二1％甲基绿溶于100mmol/L 酸钠（pH5.5）；工作液为0．1％ | 染色浅，适用于弱抗原信号，胞质大 | 获得的组织或细胞精细资料有限 |
| 坚固红 | 用于蓝色染色或LacZ检测，可用于核或细胞质抗原染色 | 可购买 | | 着色很浅，获得的组织或细胞精细资料有限 |
原创作者：杭州旺森科技有限公司
