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技术文章
大鼠肌腱干细胞
点击次数:213 发布时间:2019/5/30 10:43:34
一、产品简介
1. 产品名称:大鼠肌腱干细胞
2. 组织来源:肌腱组织
3. 产品规格:5×105
cells/T25细胞培养瓶
4. 细胞简介:
大鼠肌腱干细胞分离自肌腱组织;肌腱是肌腹两端的索状或膜状致密结缔组
织,便于肌肉附着和固定。一块肌肉的肌腱分附在两块或两块以上的不同骨上,
是由于肌腱的牵引作用才能使肌肉的收缩带动不同骨的运动。每一块骨骼肌都分
成肌腹和肌腱两部分,肌腹由肌纤维构成,色红质软,有收缩能力,肌腱由致密
结缔组织构成,色乳白较硬,没有收缩能力。肌腱把骨骼肌附着于骨骼。长肌的
肌腱多呈圆索状,阔肌的肌腱阔而薄,呈膜状,又叫腱膜。此处的肌腹即为通常
所说的红肌,而肌腱即为白肌,分别控制肌肉的力量、爆发力和耐力。肌腱干细
胞(TSCs)是一种来源于肌腱组织的间充质干细胞,其具有多向分化潜能,并且
在外源性前列腺素E2作用下异常分化。体外培养时该细胞群具有克隆形成能力、
自我更新及多向分化潜能等干细胞的普遍特性。肌腱干细胞可以被诱导向脂肪细
胞、软骨样细胞、骨细胞分化;在裸鼠模型中,肌腱干细胞还可以形成肌腱样组
织,软骨样组织以及腱-骨连接样组织等。相比骨髓间充质干细胞而言,TSCs具有
更好的克隆形成能力和增殖能力,软骨相关基因和肌腱相关基因表达更高,具有
更好的成骨、成脂和成软骨能力,因此可以作为组织工程中的种子细胞。
本公司生产的大鼠肌腱干细胞采用胶原酶、中性蛋白酶混合消化法并通过肌
腱干细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×105
cells/瓶;细胞经
CD90/CD44、CD34/CD45免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、
HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5. 培养基信息:
DMEM-F12、FBS、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用大鼠肌腱干细胞专用完全培养基(产品货号:CM-R165)作为体
外培养大鼠肌腱干细胞的培养基。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
在技术部标准操作流程下,大鼠肌腱干细胞可传8代左右,随着传代次数的
增加,细胞会呈现老化状态,生长速度减缓,4代以内细胞状态*佳;建议您收到细胞
后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱
和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培
养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待
细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2-1:3适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全
培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和
技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时
和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问
题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考
原创作者:上海雅吉生物科技有限公司