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技术文章
非酶DNA清除剂
点击次数：244 发布时间：2019/6/4 8:41:42
产品及特点
用Trizol等方法提取的细胞总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染，这些
污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前*常用的RNase-free
DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。
天恩泽开发的非酶DNA清除剂不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷，同
时还具有操作快速，稳定性好和性价比高等诸多优点，完全可以替代价格昂贵的
RNase-free DNase。
1. 高效，能使总RNA中的基因组DNA污染降上百倍（根据PCR检测）而RNA分子
完整性不会受到任何影响。
2. 不含RNase污染，所用溶液又经过天恩泽的液相RNase清除剂的处理（能不可
逆地灭活RNase）。
3. 快速，全部操作在样品管中完成，只需要十多分钟，不需要37℃保温和酚/氯
仿抽提。
4. 稳定，本产品为非酶产品，可以常温运输和4℃长期保存；而RNase-free
DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
5. 性价比高，单位成本远低于RNase-free DNase。
使用及效果
将本产品与总RNA溶液按1:3的比例（即100 μL RNA溶液需加30 μL本产品）
混合后室温离心10分钟后用1 mL 75%乙醇清洗一次即可溶解待用。
答客问
Q：能否将本产品用于去除蛋白质溶液中的DNA？
A：不能，只能用于去除RNA溶液中的DNA污染。
备忘录
RNase-free DNase一定是RNase-free吗？
去除DNase中RNase的方法有agarose-coupled amino phenylphosphoryl -uridine-2＇
（3＇）-phosphate亲和吸附法(NAR，4:241，1977)、DEAE-cellulose吸附法(Anal. Biochem.
14:269，1966)、Macaloid吸附法(Molecular Cloning p452，1982)和Iodoacetate灭活法(JBC
，244:924，1969)。从原理上将讲，用吸附法彻底去除RNase几乎是不能的，就如想在温和条件
下让一个化学平衡反应只向一个方向进行一样。*新的研究表明，在E.coli细胞中就存在20余种
RNase，而作为制备RNase-free DNase原材料的牛胰组织所含RNase种类肯定比E.coli细胞多，
用特异性本来就很差的吸附法同时去除这么多的RNase几乎是不可能的。天恩泽初步的实验结果
也显示，使用上述方法非常难以得到真正的RNase-free DNase。市场上的RNase-free DNase产品
往往含有残留的RNase污染，所以使用RNase-free DNase时一定要严格按厂家提供的操作手册执
行，过长时间的保温和用量都有可能降解您珍贵的RNA
原创作者：上海雅吉生物科技有限公司
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