本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：                                                        96T
6ng/mL - 160ng/mL

使用目的：
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中蛋白聚糖（ACAN/AGC）含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人蛋白聚糖（ACAN/AGC）水平。用纯化的人蛋白聚糖（ACAN/AGC）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入蛋白聚糖（ACAN/AGC），再与HRP标记的蛋白聚糖（ACAN/AGC）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的蛋白聚糖（ACAN/AGC）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人蛋白聚糖（ACAN/AGC）浓度。
试剂盒组成

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

4. 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请乘以总稀释倍数（×n×5）。
5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

原创作者：上海雅吉生物科技有限公司