言：通常以阳离子交换固相萃取 (SPE) 法对含有碱性药物成分的生物样品进行制备。研究人员也一直在寻找更为简便的样品处理方法以提高生物分析的通量。Agilent VersaPlateSLE 多孔板是应对大量样品的理想解决方案，因为其避免了 SPE 方法中许多常规的必须步骤，例如调节、平衡和冲洗步骤。本应用简报选择人类血浆作为生物样品基质。并使用 VersaPlate SLE 作为实际实验室方案，通过准确度数据展示了其性能和适用性。

材料与方法甲醇为 LC/MS 。将 1 mL 甲酸加入 1 L 甲醇中制备含有 0.1%甲酸的甲醇溶液；将 1 mL 甲酸加入 1 L 水中制备含有 0.1% 甲酸的水溶液。下文列出了采用 Agilent VersaPlate SLE 分离 b 阻断剂的样品制备程序。1. 用 2% 氨水 1: 1 稀释加标后的血浆2. 将 0.3 mL 加标稀释后的血浆加载到 VersaPlate 中3. 应用微真空使样品开始流动，直至所有样品被吸附剂所浸润，然后停止真空4. 等待 5 分钟，待样品吸附5. 在微真空条件下，用 0.9 mL 乙酸乙酯洗脱两次6. 蒸干并复溶于 0.15 mL 初始流动相中

条件色谱柱： Agilent ZORBAX Eclipse Plus Phenyl-Hexyl 色谱柱，2.1 x 100 mm，3.5 µm（部件号 959793-912）样品制备： Agilent VersaPlate 预装 96 孔板，含 Hydromatrix 和ChemElut，260 mg（部件号 75430260）样品： 参见表 1洗脱液： A，0.1% 甲酸B，甲醇 + 0.1% 甲酸进样量： 3 µL流速： 0.6 mL/min梯度： 时间 (min) % B0 302 303.5 804.5 804.6 307 30LC/MS/MS: Agilent 1290 Infinity LC液相色谱 与 Agilent 6460 三重四杆 LC/MS联用系统干燥气： 300 °C, 7 L/min鞘气： 325 °C, 8 L/min雾化器压力： 45 psi毛细管： 3,500 V（正）喷嘴电压： 0 V

结果与讨论所有化合物均通过 Eclipse Plus Phenyl-Hexyl 色谱柱实现了很好的色谱分离（图 1）。在 0.1 至 100 ng/mL 的整个校正范围内，得到了线性 (R2 ¡ 0.995) 的校正曲线（图 2）。

低、中、高浓度下的回收率在 81.6 至 105.8% 之间（每个浓度下n=8）。此外，该研究的 %RSD 较低（约为 4.5%），表明重现性良好，也进一步证明了 SLE 多孔板的适用性（表 2）。

结论对于样品量较小，同时样品数量很大的人类血浆样品，AgilentVersaPlate 形式的 SLE 可实现操作。不同于常规的 SPE 样品制备方法，SLE 无需进行调节、平衡或冲洗步骤。由于是采取液液萃取的方式，但无需特殊的玻璃器皿或重复的萃取步骤，只需在 VersaPlate 形式的 SLE 中进行简单的过滤，固相支持的液液萃取已成为获取可重复性数据的方法。

原创作者：上海斯迈欧分析仪器有限公司