花青素是存在于许多水果和花朵中使之呈现亮红色和蓝色（和紫色）的天然色素。蓝莓的颜色就是由水果中许多不同的花青素形成的。对花青素进行定性和定量分析可以用来区分蓝莓植物的品种和鉴定其品质。因此，花青素的色谱分离在农业和制酒业越来越受到重视。近，对花青素作为抗氧化/抗癌剂医药作用的兴趣促使了人们研究其色谱分离的兴趣。

要点提示

• 通常，在这些分离中使用低 pH 值的流动相（含有甲酸）会造成色谱柱键合相降解和分离改变(Goiffon, J.-P., Brun, M., ａnd Bourrier, M.-J., J.Chromatogr. 537 101-121, 1991)。但 ZORBAXStableBond SB-C18 色谱柱能在很低 pH值的反相色谱分离条件下提供的稳定性

• 实验中使用磷酸取代传统流动相中添加的甲酸，结果在 ZORBAX SB-C18 色谱柱上实现了大于 25种花青素的更好的分离

• 鉴于产品的重复性和拥有窄粒径分布的更小色谱填料 (3.5 µm)，分析人员可以通过系统地改变色谱柱规格来节约时间和溶剂

条件:ZORBAX SB-C18 (4.6 x 250 mm, 5 µm; 4.6 x 150 mm,3.5 µm; 4.6 x 75 mm; 3.5 µm)(安捷伦部件号分别为: 880975-902, 863953-902, 866953-902)流动相: A: 3% 磷酸 B: 100% 甲醇, 梯度: (见各自色谱图)进样: 20 µL, 1 mL/min, 30 ºC,检测: 紫外波长 (525 nm),样品制备: (见背面)

制备蓝莓提取物的方法*开始混合: 10 g 蓝莓10 ml 溶剂（ 70:28:2, 甲醇:水:甲酸）冰上混合10分钟通过玻璃棉过滤至 10 ml 注射器滤液静置1小时过0.2 µm 滤膜立即注入50 µL 进行液相色谱分析

原创作者：上海斯迈欧分析仪器有限公司