色谱流动相的制备： 1 M 甲酸铵溶液：溶解63 g甲酸铵于1 L HPLC级的水中。 流动相A：在1 L HPLC级的水中，加入2 mL甲酸和2 mL 1 M甲酸铵溶液。 流动相B：在100 mL HPLC级的水中，加入2 mL甲酸和2 mL 1 M甲酸铵溶液，用HPLC级的乙腈稀 释到1 L。

样品制备 基于Hartig等人提出的方法[1]： 每次称量两份等重的样品，其中一份加入标准染料。以往的经验告诉我们，每种基质对MS/MS灵敏 度的影响非常大，并且有时相同基质的不同样品之间的基质效应影响差别也很大。 1. 称量两份等量的匀质样品； 2. 一份溶液中加入标准品溶液； 3. 用乙腈对每个样品进行提取； 4. 加提取剂到指定的体积； 5. 过滤； 6. LC-MS/MS分析

基于Schreiber等人提出的方法[2]： 1. 称量1 g匀质后的样品； 2. 加入20 µL内标溶液 (1 µg/mL)； 3. 如果采用标准加入法分析，则需要加入标准溶液； 4. 加入10 mL 乙腈； 5. 振摇10 min； 6. 加入10 mL水； 7. 离心或过滤。

色谱分离条件 Agilent 1100 系统： G1312A二元泵系统、G1367A型自动进样器、柱温箱。 色谱柱： Phenomenex LUNA，5 µm，C8，150 mm×2 mm。 流动相：A相—水 + 2 mM 甲酸铵 + 0.2%甲酸；B相—水 / 乙腈 (10 / 90) + 2 mM 甲酸铵 + 0.2%甲酸。

MS/MS 检测 API 3200™ 和3200 QTRAP® LC-MS/MS液质系统。TurboIonSpray® 离子源，正离子模式，MRM扫描 方式。 

原创作者：上海斯迈欧分析仪器有限公司