引言：磺达肝葵钠（Fondaparinux sodium，又称Arixtra）是一种新型的全合成 抗凝血药物。它的结构中含5个糖单元，每个糖单元上都结合了磺酸基团，分 子量为1728道尔顿。磺达肝葵钠是一种高选择性Xa因子抑制剂，主要通过抗 凝血酶（ATⅢ）对Xa的特殊抑制而发挥疗效。在预防下肢深静脉血栓形成和 肺栓塞的有效性和安全性方面的研究，已证实它的作用跟低分子肝素相同， 或优于低分子肝素。磺达肝葵钠具有生物利用度高,起效快,半衰期长、不良反 应少等特点，在临床上常用作手术后抗凝血；以及深度静脉血栓病症，防止 血液凝固，抑制血栓形成；也用于治疗急性冠脉综合征。

磺达肝葵钠具有很强的极性，在常规反相C18柱上几乎没有保留；用戴安离子色谱分析，淋洗液浓度很高无法用电导检测。磺达肝葵钠本身的结构特点使得 其定量分析和有关物质检测成为一个难题。本文建立了离子色谱法分离、紫外 检测器检测磺达肝葵钠及其有关物质的方法，且干扰少，重现性好。

测试条件-仪器：ICS-5000戴安离子色谱仪（Thermofisher公司），配梯 度泵， VWD3100紫外检测器，AS自动进样器 色谱柱： CarboPac PA1 保护柱（ 1 0 . 0 µ m , 50×4 mm，P/N: 035391） CarboPac PA1 分离柱（ 1 0 . 0 µ m , 250×4 mm，P/N: 043096）； 柱温：30 ℃； 淋洗液：A：DMSO溶液（10 µL溶于1.0 L去离子水）， B：2 mol/L NaCl，梯度淋洗； 流速：1.0 mL/min； 定量环：100 µL； 检测方式：紫外波长210 nm。

样品前处理 样品经过0.22 µm尼龙滤膜过滤后，直接上机分析。结果和讨论 色谱柱的选择及淋洗液梯度条件优化 磺达肝葵钠的结构中含有五个糖单元结构，每个糖单 元上又结合了多个磺酸根，这两种结构使磺达肝葵钠具有 很强的极性，在常规反相C18柱上几乎没有保留；而解离 的磺酸根使其在离子交换色谱柱上有所保留，这种保留是用戴安离子色谱分析磺达肝葵钠的前提。同时由于多个磺酸根 的存在，磺达肝葵钠所带电荷较多，在离子交换色谱柱 上保留很强，需要使用高浓度的盐溶液才能将其从洗脱 下来。本实验选用了柱容量适合的CarboPac PA1保护柱 和分析柱，低浓度DMSO溶液和2 mol/L NaCl溶液梯度淋 洗，在所用色谱条件下（如表1），磺达肝葵钠与其有杂 质具有良好的分离度（如图1）。因Cl会对不锈钢造成锈 蚀，本实验使用的高浓度NaCl淋洗液适合于全peek材质 的离子色谱。

离子色谱常用的检测器有电导检测器、紫外检测 器、安培检测器等。磺达肝葵钠的结构中有五个糖单 元，理论上在安培检测器上有明显响应值应，但结构中 磺酸基团大大降低了该化合物在安培检测器上的灵敏 度，且高浓度的Cl也会导致安培检测器中毒；如果采用 电导检测器，高浓度的NaCl溶液使样品的电导信号淹没 在淋洗液的高背景中，无法检测到信号。选择紫外检测 器的原因有两点：首先，磺酸根基团本身具有较好的末 端吸收，磺达肝葵钠是全化学合成的，样品纯度较高， 末端基本无吸收，不会造成对磺达肝葵钠的干扰；同时 调整DMSO的用量，可以降低由于淋洗液梯度造成的基 线漂移。

重现性、线性和灵敏度 吸取浓度为5.0 mg/L的磺达苷葵钠混合标准溶液，重 复进样7次，记录色谱图，它们保留时间的相对标准偏差 分别为0.41%，峰面积的相对标准偏差分别为1.60%，峰 高的相对标准偏差分别为1.0%，重现性较好。 将标准品定量混合并用标准品溶液稀释得到一浓度 系列，对上述系列浓度各测定3次后, 取其峰面积的平均 值，以峰面积为纵坐标，标准液质量浓度为横坐标建立 标准工作曲线，磺达肝葵钠检出限为50 mg • L-1，在250- 2000 mg• L-1浓度范围内，相关系数为0.9993， RSD为 3.6%，加标回收率为91%。

结论：戴安离子色谱法分离紫外检测器测定黄达肝葵钠及其有 关物质，方法简便、稳定，线性范围内相关性好，准确 度高，受其他因素干扰小，具有较高的实用价值。

原创作者：上海斯迈欧分析仪器有限公司