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使用固相萃取-液相色谱法测定动物性食品中甲氧苄啶 残留量

点击次数:61 发布时间:2021/11/30 20:41:07

 言:甲氧苄啶 (Trimethoprim) 是一种广谱抗菌药,抗菌谱与磺胺类药物类似,可作 为兽药用作抗菌剂,也可用于球虫病的治疗。在水产养殖中甲氧苄啶往往与磺 胺类药物合用,作为磺胺类药物的增效剂。本方法参照食品安全国家标准 GB 29702-2013,建立了一种水产品中甲氧苄啶残留分析的液相色谱法。该方法 适用于鱼、虾、蟹可食组织中甲氧苄啶残留量的检测。

 

甲氧苄啶的分析 对试料进行样品处理。称取试料(大黄鱼、草虾和大闸蟹的肌肉)5±0.05 g, 于 50 mL 具塞离心管中,依次加入三氯jia烷 15 mL、甲醇 14 mL、0.1 mol/L 硫酸 溶液 6 mL,旋涡混合 2 min,5000 rpm 离心 5 min,取上清液于 250 mL 分液漏斗 中。残渣中加入甲醇 14 mL 和 0.1 mol/L 硫酸溶液 6 mL,重复提取一次,合并两 次上清液于分液漏斗中。加 2 mol/L 氢氧化钾溶液 2 mL、二氯甲烷 30 mL,振摇 2 min,静置分层,取下层液于 100 mL 鸡心瓶中。分液漏斗中加二氯甲烷 30 mL, 重复提取一次,合并两次下层液,于 40 ºC 下旋转蒸发至近干,用 5% 乙酸溶液 6 mL 溶解残余物,作为备用液。

 

所得备用液经 Agilent Bond Elut Plexa PCX 固相萃取柱净化, 复溶后用滤膜过滤,之后使用配备了 Agilent ZORBAX SB-C18 色谱柱的液相色谱系统对其中的甲氧苄啶残留量进行 分析,同时利用 Agilent Poroshell 120 SB-C18 色谱柱进行快 速分离的对比,如图 1 所示为固相萃取操作流程,如表 1 所示为液相色谱分析条件。

 

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本文分别采用 ZORBAX SB-C18 色谱柱和 Poroshell 120 SBC18 色谱柱对不同基质中的甲氧苄啶进行有效分析。如 图 2-7 所示,在甲氧苄啶分析中,Poroshell 120 SB-C18 色谱 柱在满足分离要求的提下,具有分离速度更快、灵敏度 更高等优势,因此本文选用 Poroshell 120 SB-C18 色谱柱进 行后续实验。 通过计算得到采用 Poroshell 120 SB-C18 色谱柱分析水产品中 甲氧苄啶的固相萃取-液相色谱法的定量限为 20 µg/kg; 在 0.05 µg/mL-1 µg/mL 浓度范围内,甲氧苄啶具有良好的 线性相关性,相关系数 R2 为 0.9999,如图 8 所示;在 20- 100 µg/kg 的添加水平下,不同基质空白样品加标回收率为 87.4%-95.8%,RSD(%) ≤ 5.02 (n = 6),如表 2 所示。通过上述 实验结果表明该方法的准确度和精密度满足食品安全 国家标准 GB 29702-2013 的分析要求。

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原创作者:上海斯迈欧分析仪器有限公司

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