摘要本应用简报介绍了使用 Agilent 1260 Infinity II 液相色谱与 Agilent Ultivo 三重四极杆 LC/MS (LC/TQ) 的联用系统定量分析蜂蜜样品中的低纳克级 2-AFGP。此方法采用 Ultivo LC/TQ 开发，该系统体积小巧，但结果毫不逊色。此方法是食品行业在蜂蜜生产、加工和商业检测中进行常规分析的理想选择，也十分适合用于学术研究目的。采用简单的液液萃取 (LLE) 样品前处理方法，能够成功实现基质中 2-AFGP 的0.005 mg/kg 定量限 (LOQ)。

前言蜂蜜是由蜜蜂生产的一种口味鲜美、营养丰富的食物，因具有抗氧化、抗菌和抗炎等特性而被广泛食用。然而，由于蜂蜜价格相对较高、产量有限、成分复杂，经常成为掺假的对象，损害了消费者的权益和生厂商的利益。*常见的蜂蜜掺假行为是在纯蜂蜜中添加糖浆，包括大米糖浆。此外，给蜜蜂喂食糖浆以提高产量和利润也是一种间接的掺假行为。

AFGP（2-乙酰基呋喃-3-吡喃葡萄糖苷，也称 SMR）是大米糖浆的特异性标志物，可以像其他糖类标志物一样使用稳定碳同位素比值法、脉冲安培检测法、LC-IRMS（液相色谱-同位素比值质谱法）、红外光谱法 (IR)、TLC、GC/MS 和NMR 进行检测。然而，这些传统方法费时费力，有时还会出现矛盾或假阴性结果。三重四极杆 LC/MS 系统是美国、欧盟、FSSAI 和其他国家/地区用于确认蜂蜜中污染物和掺假物的标准。本应用采用新款三重四极杆 LC/MS 系统 UltivoLC/TQ，获得的灵敏度高于食品监督管理局规定的安全限值要求。

实验条件本实验使用乙腈 (Honeywell, LC/MS,34967)、甲醇 ( H o n ey w e l l , LC / M S34966)、水 (Millipore)、甲酸 (Honeywell,LC/MS 56302)、2-乙酰基呋喃-3-吡喃葡萄糖苷（TRC Canada，部件号 G596874）和安捷伦 0.2 ?m PVDF 针头过滤器（部件号 5191-5924）。储备液采用甲醇配制，2-AFGP 工作稀释液采用水配制。萃取取 1 g 蜂蜜进行样品前处理。步骤如下：用水稀释，离心，将上清液过滤后进样至LC/MS（萃取成本更低）。详细流程如图 2 所示。

仪器本实验使用的仪器包括 Agilent 1260Infinity II 四元泵 (G7104C)、Agilent1260 Infinity II 样品瓶进样器 (G7129C)、Agilent 1260 Infinity II 高容量柱温箱(G7116A)、配备 AJS 离子源的 UltivoLC/TQ (G6465B)。LC 和 MS 参数如表 1和表 2 所示。

结果与讨论从预加标 0.05 mg/kg (50 ppb) SMR 的蜂蜜样品和空白蜂蜜萃取物的 MRM 图中可以看出，SMR 很容易检出（图 3）。印度食品安全指南 (FSSAI) 规定的检测浓度为 1 mg/kg，而使用 Ultivo LC/TQ 的方法 LOQ 为 0.005 mg/kg。此外，通过进样各种 SMR 浓度下的蜂蜜样品，获得了可重现的洗脱曲线，如图 4 所示。

原创作者：上海斯迈欧分析仪器有限公司