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了解葡萄园产地和酿酒厂对红葡萄酒元素特征的影响

点击次数:78 发布时间:2022/1/19 21:06:37

言:消费者希望了解所购买食品的安全性和可靠性的需求日益增加。在高价值 食品中掺入低品质组分或将高价值食品替换为低品质组分的现象令人担 忧。将廉价的产品使用虚假标签标注为高价值品牌,然后作为顶产品出 售,也可以获取利润,对于与特定产地相关的食品而言尤其如此。葡萄 酒、奶酪、火腿、橄榄油和蜂蜜经常出现这种情况。将 DNA 指纹图谱与多 种有机标记物的检测相结合,人们提出了一种多元素分析方法,用于鉴定 食品的真伪。 多种因素影响食品和饮料中的元素组成。例如,葡萄酒的金属元素特征取 决于葡萄种植的土壤的组成、葡萄栽培实践(例如,施用农用化学品及灌 溉)以及葡萄酒酿造过程(包括储存和陈化)[1]


通过原子光谱对痕量元素进行特征识别的方法已被用于 确定葡萄酒是否可以被鉴定为来自特定区域 [2]。多年 来,ICP-MS一直被用于葡萄酒的元素指纹图谱分析 [3-7]。 本研究采用 ICP-MS 针对葡萄园产地和酿酒厂加工过 程对 65 个红葡萄酒样品的综合影响进行了研究。使用 Agilent Mass Profiler Professional (MPP) 集成式化学计量学 软件,通过 63 种元素的浓度表征对不同葡萄酒的产地 进行建模分析。通过分析来源于同一葡萄园但是在不同 酿酒厂加工的葡萄酒,可以将葡萄园的影响与酿酒厂的 影响分开,反之亦然。这样有助于了解葡萄酒的元素特 征在生产过程中改变的程度。


实验 化学品与标准品 在所有校准溶液配制和稀释中均使用超纯水 (18 MWcm–1, EMD Millipore) 和乙醇 (200 proof, Gold Shield Distributors, Hayward, CA)。使用,将混合内标用 1% HNO3 按 1:10 进行稀释。SPEX CertiPrep 多元素校准标样(1、2A、3 和 4)和混合内标(10 mg/L,溶于 1% HNO3 中)购自 SPEX, Metuchen, NJ。超纯硝酸购自赛默飞世尔科技公 司,环境加标混合溶液来自安捷伦。 样品与样品处理 来自加利福尼亚北部五个不同葡萄园的 65 个市售红葡 萄酒样品为五家不同的商业酿酒厂所生产,如图 1 所 示。每种葡萄酒均由单一葡萄栽培品种制成,包括欧亚 种葡萄、赤霞珠、梅洛、黑比诺。每个酿酒厂均使用单 独的发酵容器对来自各个葡萄园的葡萄进行发酵。发酵 完成后,在进行其他后续发酵处理之,直接从不锈 钢罐中取样。将葡萄酒取样至不含金属的 50 mL 塑料管 (VWR, Radnor, PA) 中,在分析之储存于 4 °C 下。分析 ,将所有葡萄酒样品用 5% HNO3 按 1:3 的比例进行稀 释,使乙醇含量降至约 4%,对每个样品重复分析两次

 

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仪器:本研究采用了配备八杆反应池系统 (ORS3 ) 碰撞/反应 池的 Agilent 7700x ICP-MS。使用 1% 硝酸将含有 6 Li、Sc、 Ge、Y、In、Tb 和 Bi 的内标 (ISTD) 溶液稀释至 1 µg/L。 使用雾化器之的混合三通将 ISTD 溶液与样品在线混 合。使用安捷伦调谐混标(Li、Y、Ce、Tl 和 Co)和安捷伦检测器 P/A 校准溶液(Zn、Be、Cd、As、Ni、Pb、 Mg、Th、Ca、Co、Sr、V、Cr、Mn、6Li、Sc、In、Lu、 Bi、Y、Yb、Mo、Sb、Sn、Ge、Ru、Pd、Ti 和 Ir)对 ICPMS 进行每日的校准和调谐。利用安捷伦环境加标混合 标样对葡萄酒样品加标。表 1 列出了仪器操作参数。
 

 

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校准 用 5% HNO3 和 4% 乙醇对标准溶液进行基体匹配,使 之与葡萄酒样品重点酸和碳含量相匹配,对所有 63 种 监测的元素在 0 和 500 µg/L 的浓度之间进行六点校 准。表 2 列出了所检测的全部 46 种元素及其检测限 (LOD)。浓度较高的元素(> 500 µg/L;B、Na、Mg、 Si、P、K、Ca、Mn、Cu、Rb、Sr 和 Ba)用 5% HNO3 按 1:1000 稀释后进行分析(标准溶液用 5% 的 HNO3 进行 基体匹配)。在整个运行中分析加标样品,以确保分析 方法的有效性,并且每 10 个样品运行一次连续校准空 白样品和连续校准验证样品。
 

 

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使用 Mass Profiler Professional 软件进行数据分析 Agilent ICP-MS MassHunter 软件用于采集和分析数据。 在数据分析中,将所有葡萄酒的元素浓度导入安捷伦集 成式 MPP 化学计量学软件,对大的复杂数据组(65 个 葡萄酒样品 × 46 个监测的元素 × 三次重复测定)进行 统计分析。MPP 还提供了便于研究和确定多维数据组 的关系的数据可视化工具,在本例中,该数据组为来自 五个不同的葡萄园和酿酒厂组合的 65 个葡萄酒样品和 46 种元素浓度。在 MPP 中对 log2 刻度浓度数据进行方 差分析 (ANOVA),以评价酿酒厂和葡萄园的影响以及酿 酒厂与葡萄园的相互影响。将统计显著性设置为 5%。 选择规范变量分析 (CVA) 作为一种分类技术,使用多变 量 ANOVA 模型研究各个酿酒厂、葡萄园和酿酒厂-葡萄 园组合彼此之间的差异。
 


结果与讨论:元素分析 在 63 种监测的元素中,检测到 46 种,将这 46 种元素 包含于随后的数据分析中。在整个序列中分析加标样 品得到的回收率在 93%(对于 Ba)和 103%(对于 Ca) 之间。所检测的元素未表现出与不同的葡萄栽培品种相 关联的显著差异。然而,在五家不同的酿酒厂(33 种 显著不同的元素)、五家不同的葡萄园(26 种显著不同 的元素)和 15 种不同的酿酒厂-葡萄园组合(17 种显著 不同的元素:Be、Na、P、Ti、Zn、As、Rb、Cd、Sb、 Cs、La、Pr、Dy、Er、Tm、Yb 和 Tl)之间发现元素含量 存在显著差异。这些发现表明葡萄种植与葡萄酒酿造均 影响葡萄酒的元素组成。相比于不同的葡萄园产地,采 用不同加工方法的酿酒厂所制得的葡萄酒之间存在更多 显著不同的元素。这可以解释为葡萄酒酿造方法比葡萄 园位置对葡萄酒的元素含量影响更大。有关葡萄园和酿 酒厂影响的完整详细数据可参见 Hopfer 等人于 2015 年 发表的文献 [1]。


酿酒厂与葡萄园相互影响 基于上文提及的 17 种元素,使用 MPP 软件获得样品的 CVA 图示(图 2)。来自 A 和 B 酿酒厂的葡萄酒存在清晰 的簇。葡萄园 1 中种植的葡萄(A1、C1 和 D1)形成群 组,与酿造葡萄酒的酿酒厂无关。类似的模式存在于葡 萄园 5 中种植的葡萄。葡萄园 2 和 3 在地理位置上彼此 靠近,其土壤条件可能相似。这反映在分值图(图 2) 中,其中 A2 和 B2 葡萄酒位于图片右侧,而 A3 和 B3 葡萄酒位于左侧。对于葡萄园 4 中种植的葡萄,仅制备 了两个样品(B4 和 E4),而结果表明酿酒厂对元素组 成的影响掩盖了葡萄园的影响。 根据图 3A 和 3B 所示的分值箱线图和总结构系数,可 以研究哪些元素促成了图 2 所示的葡萄酒样品的分离。 图 3A 表明沿水平维度 CV1,葡萄酒受到较强的葡 萄园影响(对于出现在 CV1 刻度相对侧的葡萄园 1 和 5 而言)或受到酿酒厂葡萄园综合影响(对于酿酒厂 A 和 B 以及葡萄园 2 和 4)而分离。引起葡萄酒的水平 分离的元素如图 3B 所示。右侧葡萄酒中存在较高浓度 的 Be、Rb、Cs、Tl 和某些稀土元素,而左侧葡萄酒与 Na、P、Ti、Zn、As 相关并且在较小程度上与 Cd 和 Sb 相关。

 

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结论 元素分析越来越多地应用于对食品和饮料(包括葡萄 酒)的产地进行表征。为了更好地了解葡萄园产地和酿 酒厂加工的综合影响,通过将 Agilent 7700x/7800 ICP-MS与 Agilent Mass Profiler Professional 化学计量学软件相结 合对 65 个红葡萄酒中的元素含量进行了研究。研究表 明元素特征无法区分不同类型的葡萄(葡萄品种)。然 而,元素指纹图谱分析能够根据葡萄园产地、酿酒厂以 及两种因素的组合对葡萄酒样品进行分类。17 种元素 表明存在显著的酿酒厂-葡萄园相互影响,即在 15 种酿 酒厂葡萄园组合中,这 17 种元素的元素浓度均在不同 程度上受到葡萄种植和葡萄酒酿造的共同影响。对这些 综合影响的研究使我们对使用多元素指纹图谱测定红葡 萄酒的产地有了更深入的了解。
 


 

原创作者:上海斯迈欧分析仪器有限公司

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