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Agilent 6470三重四杆质谱仪分析血浆基质中药物的稳定性

点击次数:80 发布时间:2022/2/17 20:50:41

 言:在药物开发过程中,需要通过一系列体外 和体内 方法筛查有待进一步开发的潜在候选药 物。由于基质组分(血浆、尿液等)的存在,代谢物的体内鉴定和定量分析面对着严峻的挑 战,需要采用灵敏、稳定的分析技术以便实现候选药物的高通量筛查。常用的分析方法是 采用多反应监测 (MRM) 模式下的三重四杆质谱仪。然而,这类系统的分析性能将会随不 挥发性样品基质组分在离子源和离子迁移光学系统中的积聚而逐渐下降。因此,为维持可能需要频繁清洗。

 

Agilent 6470 三重四杆质谱 (MS) 系统采用多项关键的创新性设 计,能够在较宽的线性动态范围内对复杂样品基质中的目标分析物进行灵敏、精密而稳定的 定量分析。这些创新性设计包括: • 经过优化的离子光学元件和过滤器几何尺寸,可在增加离子传输的同时大程 度减少污染 • 弯曲的圆锥形六杆碰撞池,能够实现的 MS/MS 碎裂与离子传输 • 具有高能量转换打拿和低噪音特性的离子检测器,能够在较宽的 m/z 范围内实现 更有效的正离子与负离子检测 本应用简报证明了使用 Agilent 6470 三重四杆质谱仪结合 Agilent RapidFire 365 高通量 MS (HTMS) 系统在血浆中药物的快速和稳定分析中所具备的优势。

 

Agilent 6470 三重四杆质谱系统 的稳定性评估 实验采用分别加入 5 ng/mL 阿pu唑仑、氯 dan平及其相应内标 (IS)(分别为阿pu唑 仑-D5 和氯dan平-D4)混合物的沉淀猪血浆, 来评估 6470 三重四杆质谱仪与 RapidFire 365 HTMS 联用系统的分析稳定性。采用体 积比为 1:3 的乙腈对猪血浆进行沉淀,随后 在 13500 rpm 下离心 5 分钟。在加入分析 物及内标之用水稀释上清液 (1:10)。将加 标血浆样品转移至 96 孔微量滴定板中,并 在进行 RapidFire/MS 分析之使用安捷伦 PlateLoc 微孔板热封膜机将其密封。 将 RapidFire 365 HTMS 参数优化后得出下 列 RapidFire 方法条件: 清洗溶剂 1(缓冲液 A,流速 1.50 mL/min) 水 + 2 mM 醋酸铵 + 0.1% 甲酸 清洗溶剂 2(缓冲液 B,流速 1.25 mL/min) 20% 乙腈(水溶液)+ 10 mM 醋酸铵 + 0.1% 甲酸 采用流速为 1.25 mL/min 的洗脱溶剂(缓 冲液 C,75% 乙酸乙酯的甲醇溶液)将分析 物从安捷伦 A 型 (C4) 小柱上洗脱下来。在 连续五天内以大约 15 /样品的速度分析血 浆中的小分子药物(2000 次进样/天)。本 研究中使用的经过优化的 6470 三重

 

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图 2 显示了 10000 次进样开始和结束时阿pu唑仑 (A) 和氯dan平 (B) 的叠加 MRM 色谱 图。图 2 表明经过 10000 次进样后,阿pu唑仑和氯dan平的峰形和峰面积(峰高)仍保 持不变。 结论 Agilent 6470 三重四杆质谱仪采用创新性 离子迁移光学系统设计,能够大程度减少 样品积聚的不良影响,为沉淀血浆样品中目 标候选药物的超高通量分析提供了稳定的分 析平台。

 

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原创作者:上海斯迈欧分析仪器有限公司

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