您好,欢迎来到易推广 请登录 免费注册

  • 高级会员服务
  • |
  • 广告位服务
  • |
  • 设为首页
  • |
  • 收藏本站
  • |
  • 企业档案

    • 会员类型:初级版会员
    • 易推广初级版会员:6
    • 工商认证【已认证】
    • 最后认证时间:
    • 注册号: 【已认证】
    • 法人代表: 【已认证】
    • 企业类型:经销商 【已认证】
    • 注册资金:人民币万 【已认证】
    • 产品数:732

上海斯迈欧分析仪器有限公司 主营产品:珀金埃尔默,赛默飞,岛津,安捷伦,沃特世,AB,耶拿,日立等品牌),气相色谱,液相色谱,原子吸收光谱仪,紫外分光光度计,气质联用仪,液质联用仪

易推广认证请放心拨打

18602175640

当前位置:易推广 > 上海斯迈欧分析仪器有限公司>公司新闻>药物疫苗中蛋白检测的TN分析法

企业档案

会员类型:初级版会员

已获得易推广信誉   等级评定
14成长值

(0 -40)基础信誉积累,可浏览访问

(41-90)良好信誉积累,可接洽商谈

(91+  )优质信誉积累,可持续信赖

易推广初级版会员:6

工商认证 【已认证】

最后认证时间:

注册号: 【已认证】

法人代表: 【已认证】

企业类型:经销商 【已认证】

注册资金:人民币万 【已认证】

产品数:732

参观次数:1130292

手机网站:http://m.yituig.com/c143412/

商铺地址:http://http://www.chem17.com/st389184/

X射线分析仪 XRD

X荧光光谱仪

XPS-X射线光电子能谱仪

液质联用仪LC-MS

气质联用仪GC-MS

等离子体质谱ICP-MS

原子吸收光谱仪AAS

等离子体光谱ICP-AES/OES

近红外光谱NIR

红外显微镜

动态热机械分析仪DMA

热重分析仪(热天平)

热分析联用仪

样品前处理

离子色谱仪IC

顶空进样器

赛默飞无机质谱仪

同步热分析仪STA

赛默飞水质分析仪

差示扫描量热仪DSC

荧光分光光度计

气相色谱仪GC

红外光谱仪(IR、傅里叶)

液相色谱仪LC

紫外分光光度计UV(可见)

辐射仪、射线检测仪

粘度计

挤出机

流变仪

拉曼光谱

日立仪器

其他

公司新闻

药物疫苗中蛋白检测的TN分析法

点击次数:272发布时间:2021/9/23

 背景介绍

在药物疫苗生产中,需要对起始、中间和终产品的抗原水平进行控制。用以检测衰减失活的病毒或细菌数量。由于这些抗原通常由蛋白质组成,总蛋白的分析定量是一种可选方法。

《药典》规定了许多相关方法,其中包括几种紫外/可见分光光度法(如Lowry法、Bradford法、BCA法)以及两种总氮法,即凯氏定氮法和催化燃烧法。本应用说明重点介绍了欧洲药典Pharm. Eur. 2.5.33, Method 7 B催化燃烧法氮化合物在氧气中高温裂解为一氧化氮(NO),然后通过化学发光检测器(CLD)进行检测。此方法描述几乎与EN 12260一致,后者描述了环境水中TNb的测定 multi N/C分析仪既是如此设计,因此也可用于医药产品中TNb的测定。TNb可以转化为总蛋白来确定抗原的水平。

由于蛋白质的含氮量不同,根据以下公式乘以系数6.25,将总氮浓度转换为总蛋白质浓度已被广泛接受:

C [总蛋白] = c [TN] x 6.25  

 

image.png

 

仪器

表1: 分析仪说明:multi N/C 2100S

1627363612(1).jpg

 

样品和试剂

在客户现场制备的5个尿素TNb校准标准、1个BSA对照标准品和3个未知客户样品,测定三次。分析,样品在4下制冷剂中保存。

恢复至室温室后,用微量移液管将液体样品直接转移到2毫升样品瓶中,并盖上瓶盖。自动进样器取样75μL样品直接注射进燃烧炉中。在铂催化剂的作用下,所有氮化合物在纯氧环境中通过高温燃烧催化转化为一氧化氮(NO随后化学发光检测器(CLD)定量检测NO

测样顺序、自动搅拌及洗针设置均由AS60自动进样器控制完成。

 

 

校正

用BSA蛋白质标准溶液配置5  60 mg/L系列总氮(TNb)多点校准标样。200mg TN/L BSA储备溶液(Sigma Art.Nr. A-7906,白蛋白,牛含量为15.60%,纯度为98%),重128.2mg,用超纯水定容至100mL此类样品中从测定的氮含量计算蛋白质浓度的标准转换因子(在文献中找到)6.25

 

 

image.png

图1:TN示例  BSA校正曲线和特征范围5-60mg/L N


 

结果和讨论

每个样品至少测定三次。

表3: 方法设置

image.png

image.png


结论

所有样品都得到了很好的重复性,RSD值很低。

采用微量注射器进样,从样品瓶到燃烧炉的距离短,直接注射无传输管路和阀门。样品消耗量少,3次润洗,5次75μL重复测试,样品消耗总体积不超过1.5mL。

配置CLD检测器的multi N/C分析仪是进行总氮测定的分析系统,遵循Pharma Eur. 2.5.22 method 7 B。客户的校准标准品和检查标准(BSA)的回收率佳,样品峰型多次测量均无偏移重复性好,且无拖尾,充分证明了仪器性能。

相关产品

中国彩虹热线
在线咨询

提交