引言

防腐剂是一类重要的食品添加剂，它延长了食品的贮存期和货架期，防止了有毒微生物的危害，对食品工业的发展发挥了巨大的作用。但是它在促进食品工业发展的同时，也在食品安全方面产生了巨大的隐患，影响了人们的身体健康。这就需要我们能够准确地测量食品中添加剂的含量。本文采用高效液相色谱发来测定，具有方法简单，灵敏度高的特点。

1 仪器与药品

伍丰LC-100等度系统。包括泵LC-100P，柱温箱LC-100 CO，检测器UV-100

自动进样器Arcus 5等。超声波清洗机，PH计，电子天平。

苯甲酸、山梨酸、糖精钠对照品（中国药品生物制品检定所）

雪碧

甲醇为HPLC级，醋酸铵为分析纯

2 分析条件

仪器：    LC-100高效液相色谱仪

色谱柱：  Athena  C18， 4.6*250mm， 5um

流动相：  A：B=5:95

A: 甲醇      B: 醋酸铵水溶液（称量1.54g乙酸铵溶于1L水中）

流速：    1mL/min

检测波长：230nm

进样量： 10uL

柱温：   28℃ 

3 样品处理

对照品溶液：分别将苯甲酸，山梨酸，糖精钠标准品配成1mg/mL的溶液。然后分别用甲醇将苯甲酸钠，山梨酸钾溶液稀释成0.32mg/mL，0.16mg/mL，0.08mg/mL，0.04mg/mL，0.02mg/mL的溶液。糖精钠溶液用水稀释成0.32mg/mL，0.16mg/mL，0.08mg/mL，0.04mg/mL，0.02mg/mL的溶液。

样品制备：称取雪碧10.003g，用水稀释至25mL，用1:1的氨水调PH至中性。用0.45um滤膜过滤后待用。

4 实验步骤

4.1 线性关系考察

吸取上述对照品溶液各10 μL注入液相色谱仪，记录色谱图以及苯甲酸、山梨酸、糖精钠的峰面积。以三种物质的质量浓度对峰面积进行线性回归。结果表明，三种物质在质量浓度0.02mg/mL-0.32 mg/mL范围内有良好的线性，线性相关系数r均大于0.999。

4 实验步骤

4.1 线性关系考察

吸取上述对照品溶液各10 μL注入液相色谱仪，记录色谱图以及苯甲酸、山梨酸、糖精钠的峰面积。以三种物质的质量浓度对峰面积进行线性回归。结果表明，三种物质在质量浓度0.02mg/mL-0.32 mg/mL范围内有良好的线性，线性相关系数r均大于0.999。

图1：苯甲酸校准曲线

       图2：山梨酸校准曲线                                                                   图3：糖精钠校准曲线

4.2 实际样品分析

将上述配好的雪碧溶液吸取10 μL注入液相色谱仪记录色谱峰面积，使用外标法计算含量。测得市售雪碧中苯甲酸的含量为0.14g/kg。小于国家规定的0.2g/kg的标准。

                                                图4：对照品谱图

                                               图5：雪碧样品                

5讨论与建议

本方法对于市售雪碧中防腐剂做了相关实验，选取相关浓度的标准品对三种添加剂做标准曲线，线性范围良好，线性相关系数r大于0.999。根据标准曲线得出市售雪碧的苯甲酸含量，重复性好。

数据表明，LC-100适合对食品中苯甲酸，山梨酸，糖精钠进行检测。该方法操作简单简单，分析时间短，专属性强。可以满足市售饮料中防腐剂测定。