本生浅谈：elisa试剂盒实验中常见问题及解决方法

　　、挑选试剂

　　挑选质量优良的检测试剂，严格按照试剂阐明书进行操作，操作将试剂在室温下平衡30-60分钟。

　　二、加样

　　或许原因：

　　1)血清或血浆标本别离欠好即进行加样;

　　2)手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱等待时刻过长(特别是室内温度较高时);

　　3)加完标本再加酶试剂时酶溅起孔外。

　　解决办法：

　　1) 标本为血清：将血液先自然寄存1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆：有必要运用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后有必要立即颠倒采血管混合5-10次，放置段时刻后，3000rpm离心15分钟;若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要储存，则置于-20℃的低温冰箱内。

　　2) 加样后及时放入孵箱。

　　3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板外表轻拭吸干。

　　4) 假如采用AT或其他全自动加样，挑选FAME或其他后处理仪器加酶试剂。

　　5) 标本较多时，请分批操作。

　　三、 孵育

　　或许原因：

　　1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸腾，吸附于孔壁，难于清洗完全;

　　2) 孵育时刻人为延伸，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗完全。

　　解决办法：

　　1) 贴封片或加盖;

　　2) 按阐明过程严格控制操作时刻。

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