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技术文章
大家来了解下,细胞冻存的注意事项! 2023已更新(每日/实时)
点击次数:15284 发布时间:2023/10/11 9:45:18
大家来了解下,细胞冻存的注意事项!
细胞冻存是利用细胞冻存管,将细胞放在低温环境,减少细胞代谢,以便储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法,起到了细胞保种的作用。不妨来看看BUNSEN本生小编的详解:
细胞冻存与复苏:
一般来说,细胞进行转移,的策略是进行低温保存,而细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均已停止,即代谢处于停止状态,故而可以保存
1、从增殖期到形成致密的单层细胞以的培养细胞都可以用于冻存,但为对数生胞。在冻存天尽量换培养液;
2、将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免冻伤;
3、冻存和复苏尽量用新配制的培养液。
细胞冻存:
目细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由冰晶形成的细胞损伤。
1、10%的DMSO+90%胎牛血清。甘油一般用于菌种保存很少用于细胞冻存。
2、取对数生的细胞,用胰蛋白酶把单层生长的细胞消化下来,悬浮生长的细胞则直接将细胞移至15ml离心管中。
3、离心1000 rpm,5 min.
4、去除胰蛋白酶及旧的培养液,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的终密度为5x10^6/ml~1x10^7/ml.
5、 在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者。
6、 冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/min;当温度达到-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。
大家来了解下,细胞冻存的注意事项!本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。
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