天津本生揭秘：胎牛血清售后常见问题
 

　　一：血清中常见的沉淀物问题

　　科研人员在使用血清时常常会遇到各种沉淀问题，血清中可能会存在以下种类的沉淀物：

　　1、纤维蛋白：

　　实验室人员血清化冻后发现有絮状沉淀，它是由纤维蛋白的凝聚产生，对血清质量没有任何影响。纤维蛋白是常见的沉淀物，肉眼可观察的到，直径达到1-2mm。纤维蛋白的析出与血清存时间、化冻次数、化冻方式等有关，属正常现象，不影响细胞培养。

　　2、盐析出(如磷酸钙)，也是常见沉淀物，镜下观察可见晶体或者小黑点，并且在37℃培的时候会增加，这些小黑点由于布朗运动看上去像是在活动，因此经常被误认为是微生物污染。

　　3、胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质。

　　4、其他可能会增加沉淀的情况：

　　热灭活

　　在不适宜的温度环境中存放

　　Y射线照射

　　配制试剂时pH的变化

　　二：热灭活问题

　　1、 如何正确热灭活?

　　将正常化冻后的血清56℃30分钟进行灭活，期间应进行多次摇晃使其受热均匀。

　　2、为什么血清灭活后产生大量沉淀，有时在底部还会出现胶状物质?

　　血清灭活后出现的沉淀大多数是纤维蛋白析出，属正常现象，灭活过程多次摇晃使血清受热均匀可以降低蛋白的析出;

　　当血清在未化冻状态时直接置56℃水浴或者灭活过程中局部受热过高时会产生胶状沉淀，导致血清无法继续正常使用。

　　3、血清灭活的目的

　　血清热灭活目的是为了去除血清中补体等对热敏感的物质，但是在胎牛血清中对补体的灭活则明显没有必要。即使是在未稀释的血清中，也未发现有明显的溶血现象。多数实验室在培养将培养液进行预热的过程，也对热敏的补体有灭活的作用。热灭活另一个目的是为了使支原体失活。

　　4、什么是灭能?

　　灭活和灭能是同一个意思，叫法不同。

　　5、是否所有血清使用必须灭活?

　　多数细胞培养中血清的热灭活并不是必要的。很多场合下，热灭活并不会改善细胞的生长，却降低了支持细胞生长的能力。即使在少数有促进的情况下，其促进的比率也是微不足道。另外，血清的热灭活导致的沉淀常常被认为是微生物污染，从而给用户和供应商都带来不必要的麻烦。因此建议，对血清进行灭活的用户，需要通过试验来证实其必要性。

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