BUNSEN本生快讯：Elisa试剂盒原理及相关检测方法

　　elisa试剂盒介绍

　　ELISA试剂盒在国内有许多种叫法，例如：ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等，比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。 ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来，得到科研工作者的及推崇，在欧美及中国获得很大的推广，尤其是国内生化域的长足发展。 Elisa生物试验是一种敏感性高，特异性强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各域中。

　　elisa试剂盒原理

　　酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay，简写ELISA)指将可溶性的抗原或抗体结合到?>聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。
 

　　分类方法

　　夹心法

　　夹心法常用于检测大分子抗原，一般的操作步骤为：

　　将具有一性的抗体固著(coating)于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体;

　　加入待测检体，检体中若含有待测的抗原，则其会与塑胶孔盘上的抗体进行一性键结;

　　洗去多余待测检体，加入另一种对抗原一的一次抗体，与待测抗原进行键结;

　　洗去多余未键结一次抗体，加入带有酶的二次抗体，与一次抗体键结;

　　洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或仪器读取呈色结果。

　　间接法

　　间接法常用于检测抗体，一般的操作步骤为：

　　将已知的抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余的抗原;

　　加入待测检体，检体中若含有待测的一次抗体，则其会与塑胶孔盘上的抗原进行一性键结;

　　洗去多余待测检体，加入带有酶的二次抗体，与待测的一次抗体键结;

　　洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酶呈色，藉仪器(ELISA reader)测定塑胶盘中的吸光值(OD值)，以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。

　　竞争法

　　竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制，一般用于检测小分子抗原，其操作步骤为：

　　将具有一性的抗体固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余抗体;

　　加入待测检体，使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行一性键结;

　　加入带有酶的抗原，此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行一性键结，由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限，因此当检体中抗原的量越多，则带有酶的抗原可键结的固著抗体就越少，亦即，两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结，即所谓竞争法之由来;

　　洗去检体与带有酶的抗原，加入酶底物使酶呈色，当检体中抗原量越多，代表塑胶孔盘内留下之带有酶的抗原越少，显色也就越浅。

　　Elisa试剂盒本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。

原创作者：本生（天津）健康科技有限公司