人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒使用说明书通常包括试剂盒的用途、实验原理、试剂盒组成、样本处理及要求、操作步骤、注意事项以及试剂盒性能等内容。以下是一份基于多个来源整合的IGF-1 ELISA试剂盒使用说明书概要：

　　一、试剂盒用途

　　本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人胰岛素样生长因子1(IGF-1)的含量。

　　二、实验原理

　　试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人胰岛素样生长因子1(IGF-1)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胰岛素样生长因子1(IGF-1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。

　　三、试剂盒组成

　　试剂盒通常包含以下组件(具体数量可能因不同厂家或批次而异)：

　　酶标包被板

　　标准品

　　标准品稀释液

　　酶标试剂

　　样品稀释液

　　显色剂A液和B液

　　终止液

　　浓缩洗涤液

　　封板膜

　　密封袋

　　说明书

　　四、样本处理及要求

　　?血清?：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　?血浆?：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　?组织匀浆?：用预冷的PBS(0.01M，pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果)，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比)加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5-10分钟，取上清检测。

　　?细胞培养物上清或其它生物标本?：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　五、操作步骤

　　?标准品的稀释与加样?：在酶标包被板上设标准品孔，加入不同浓度的标准品。

　　?加样?：分别设空白孔、待测样品孔，加入待测样品。

　　?温育?：用封板膜封板后置37℃温育一定时间。

　　?洗涤?：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置后弃去，重复多次，拍干。

　　?加酶?：每孔加入酶标试剂(空白孔除外)。

　　?温育?：同前。

　　?洗涤?：同前。

　　?显色?：每孔加入显色剂A和B，轻轻震荡混匀，37℃避光显色一定时间。

　　?终止?：每孔加终止液，终止反应。

　　?测定?：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。

　　六、注意事项

　　试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

　　浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

　　各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。

　　请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。

　　封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　底物请避光保存。

　　严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

　　所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

　　七、试剂盒性能

　　?检测范围?：根据不同厂家和批次，检测范围可能有所不同，如5ng/mL~160ng/mL。

　　?灵敏度?：低检测浓度小于一定值，如1.0ng/mL。

　　?特异性?：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

　　?重复性?：板内变异系数和板间变异系数均小于一定值，如板内变异系数小于10%，板间变异系数小于15%。

　　请注意，以上内容仅为一般性说明，具体使用时应严格遵循所购试剂盒附带的使用说明书进行操作。

原创作者：本生（天津）健康科技有限公司